實驗材料 雄大鼠
試劑、試劑盒 勻漿緩沖液
儀器、耗材 Polytron 勻漿器
實驗步驟
1. 將按要求進用標準食物和飲水的雄大鼠（約 250 g) ，用斷頭和放血的方法處死。
2. 切下肝臟（10~13 g ) 并用刀片切碎。
3. 用一只 Polytron 勻漿器（20 ST 或 10 ST；Brinkman lnslruments) 以 10000 r/min 的頻率將每份肝臟在 2 倍體積的勻漿介質中處理 40 秒鐘。
勻漿緩沖液：
50 mmol/L Tris -馬來酸（Tris-maleate)，pH 6.4
0.5 mol/L 蔗糖
1% 葡聚糖（Sigma，平均分子量 225000）
4. 將勻漿液于 5000 g 離心 15 分鐘，去除大部分上淸，用一只裝有橡膠球的大孔巴斯德吸管（內徑約 1 mm ) 將沉淀中黃褐色的部分（上部 1/3 ) 重懸于少量的上清中。
5. 用吸管將懸液吹吸大約 12 次使之混勻，將懸液鋪在 1.2 mol/L 蔗糖之上。
6. 在一只吊籃式轉頭（Spinco SW50.1 ) 中將管子于 100000 g 離心 30 分鐘。
7. 用一只巴斯德吸管將上清吸出，然后用一只裝有橡膠氣球的巴斯德吸管將高爾基體的 “毯子”從 1.2 mol/L 蔗糖層上挑起。
8. 將這部分高爾基體懸于以下中的一種：
(1) 來自蔗糖梯度的清亮上清，適于最佳形態的保持。
(2) 蒸餾水用于達到最高的分部純度。
(3) 勻漿介質或酶分析混合液（cocktail) 用于保持酶的活性。
9. 以 5000 g 離心 15~20 分鐘收集高爾基體。