從小鼠腹水中純化mcab的方法有鹽析、離子交換層析、凝膠過濾和親合層析等。應用tsk deae-spw離子交換層析柱從小鼠腹水中純化mcab不僅純化速度快，回收率和得率高，而且保持良好的生物學活性。
一、原理
根據離子交換原理，將經硫酸銨粗提的含mcabγ球蛋白上樣結合于層析柱上，通過增加洗脫液中的離子強度，洗脫并收集蛋白峰。
二、試劑和器材
1、tsk deae spw離子交換層析柱（75mm×7.5mm，bio rad）
2、高效液相色譜儀（包括控制系統、溶劑傳遞系統、高壓加壓活門和紫外280nm監測系統）
3、PBS，緩沖液a和b。
三、操作步驟
腹水離心10000 g，10min，除去細胞和雜質，在4℃下逐滴加入飽和硫酸銨溶液，使終濃度為40%飽和硫酸銨
↓攪拌20～30min
離心，沉淀用40%飽和硫酸銨洗滌2次后溶于PBS，對緩沖液a（pH8.5， 20mmol/l tris緩沖液）透析除鹽
↓4℃過夜
用帶有1000μl樣品環的高壓加樣活門將透析后粗提物加樣于經緩沖液a液平衡的tsk deae spw離子交換層析柱
↓
洗脫流速1ml/min
0～1min ：0→5%緩沖液b（20nmol/l tris， pH 8.5，含2.0 mol/l醋酸鈉）
1～2 min（ 線性梯度洗脫）：5→20%緩沖液b
20～22min：20→0%緩沖液b
↓
洗脫液用紫外280nm進行監測
↓
收集蛋白峰，進行含量、純度和活性測定
四、注意事項
1、所用緩沖液和加樣粗提物均需0.2μm濾膜過濾。
2、在本實驗條件下，IgG1峰一般在線性梯度洗脫開始11-12min。但不同類和亞類抗體以及不同特異性mcab 的存留時間（retention time）有所差異。