動物源性食品等不同基質中糖皮質激素類藥物的檢測方法主要采用液相色譜法（HPLC）、液質聯用法（LC-MS 或LC-MS/MS）和氣質聯用法（GC-MS）。
| 實驗方法原理 | 糖皮質激素是由腎上腺皮質分泌的一類甾體激素，具有調節糖、脂肪和蛋白質的生物合成和代謝的作用，還具有抗炎作用，稱其為“糖皮質激素”是因為其調節糖類代謝的活性最早為人們所認識。糖皮質激素的基本結構特征包括腎上腺皮質激素所具有的C3的羰基、Δ4和17 β酮醇側鏈以及糖皮質激素獨有的17 α-OH和11 β-OH。 |
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| 實驗材料 | 動物源性食品 |
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| 試劑、試劑盒 | 標準品潑尼松潑尼松龍地塞米松倍他米松氟氫可的松甲基潑尼松倍氯米松氫化可的松 |
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| 儀器、耗材 | TSQ Quantum三重四極桿串聯質譜儀電噴霧電離源Surveyor AS自動進樣器 |
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| 實驗步驟 | 一、樣品制備
1.提取
在室溫下，稱取（2 ± 0.05）g組織樣品于50 mL離心管內，加乙酸乙酯15 mL，渦旋混勻提取3 min，離心10 min（4000 rpm），移取乙酸乙酯層至50 ml梨形瓶中。殘渣中加0.1 mol/L NaOH溶液10 mL，混勻，加乙酸乙酯15 mL提取后移取乙酸乙酯層。合并兩次提取液，40 ℃下減壓濃縮近干，加入乙酸乙酯1.0 mL和正己烷5 mL,使之充分溶解，待凈化。
2.凈化
用Silica固相萃取柱進行SPE凈化。用正己烷5 mL活化固相萃取柱后，上樣，先用正己烷 5 mL淋洗，抽干，然后用正己烷——丙酮（6∶4，v/v）5 mL洗脫。洗脫液在40 ℃下 N2吹干，以20％乙腈水溶液1.0 mL溶解殘渣，過0.45 μm濾膜，供LC/MS/MS法測定液相色譜及質譜條件
二、色譜條件
1.色譜柱：Thermo Hypersil Gold （150 × 2.1 mm,5 μm）；梯度洗脫見表1，其中A：水（含0.01 %甲酸）；B：乙腈；流速：250 μL/min；進樣量：10 μL。
2.質譜條件
電噴霧電離源（ESI），負離子模式；選擇反應監控（SRM）掃描模式，噴霧電壓：3500 V；離子傳輸管溫度：350 ℃；氮氣作為鞘氣和輔助氣，其中鞘氣為40 arb, 輔助氣為5 arb，氬氣用作碰撞氣， 碰撞壓力為1.5 mTorr; 選擇反應監測（SRM）。 展開 |
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| 其他 | 本方法糖皮質激素類藥物在豬、牛、羊的肝臟和肌肉，雞肉，雞蛋，牛奶中的提取回收率均可達60 - 110 %，滿足國內外的最低檢出限要求，并且定量定性準確，重現性好。 |
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