高效液相色譜儀常用的幾種檢測器

1  紫外吸收檢測器（UV）

紫外吸收(UV)檢測器是目前HPLC應用廣泛的檢測器。其工作原理是朗伯-比爾定律。這種檢測器靈敏度高，線性范圍寬，對流速和溫度變化不敏感，可用于梯度洗脫分離。紫外吸收檢測要求被檢測樣品組分有紫外-可見光吸收，而使用的流動相無吸收，或在被測組分吸收波長處無吸收。一般選擇在欲分析物有最大吸收的波長處進行檢測，以獲得最大靈敏度和抗干擾能力。在沒有最大吸收時，可采用末端吸收。檢測波長的選擇除取決于待測物質的成分和分子結構外，還必須考慮流動相組成、共存組分干擾等因素。特別是各種溶劑都有一定的透過波長下限值，超過這個波長，溶劑的吸收會變得很強，以至于不能很好地測出待測物質的吸收強度。下表列出了HPLC中一些常用的溶劑透過波長的下限。

2  熒光檢測器（FID）

熒光檢測器（fluorescence detector， FD）是一種高靈敏度、有選擇性的檢測器，可檢測能產生熒光的化合物。熒光檢測器的原理與熒光分析法相同，化合物受紫外光激發后，發射出比激發光波長更長的光，稱為熒光或發射光。許多藥物和生命活性物質具有天然熒光,能直接檢測，某些不發熒光的物質可通過化學衍生化生成熒光衍生物，然后進行熒光檢測。其最小檢測濃度可達0.1 ng／mL，適用于痕量分析。一般情況下，熒光檢測器的靈敏度比紫外檢測器約高2個數量級，但其線性范圍不如紫外檢測器寬。近年來，采用激光作為熒光檢測器的光源而產生的激光誘導熒光檢測器增強了熒光檢測的信噪比，因而具有很高的靈敏度，在痕量和超痕量分析中得到廣泛應用。 

3  示差折光檢測器（RID）

示差折光檢測器（differential refractive Index detector， RID）是一種通用的濃度檢測器，對所有溶質都有響應。某些不能用選擇性檢測器檢測的組分，如高分子化合物、糖類、脂肪烷烴等，可用示差檢測器檢測。示差檢測器是基于連續測定樣品流路和參比流路之間折射率的變化來測定樣品含量的。光從一種介質進入另一種介質時，由于兩種物質的折射率不同就會產生折射。只要樣品組分與流動相的折光指數不同，就可被檢測，二者相差愈大，靈敏度愈高。在一定濃度范圍內檢測器的輸出與溶質濃度成正比。 

4 蒸發光散射檢測器（ELSD）

蒸發光散射檢測器(evaporative light—scattering detector，ELSD)是20世紀90年代出現的新型通用型質量檢測器，它適用于檢測揮發性低于流動相的組分，主要用于檢測糖類、高級脂肪酸、磷脂、維生素、氨基酸、甘油三酯及甾體等，并在沒有標準品和化合物結構參數未知的情況下檢測未知化合物。對各物質有幾乎相同的響應，但是其靈敏度比較低，尤其是有紫外吸收的組分。此外流動相必須是揮發性的，不能含有緩沖鹽等。它的通用檢測原理克服了常見于HPLC傳統檢測方法的不足，已越來越多地應用于HPLC、超臨界色譜和逆流色譜中。不同于紫外和熒光檢測器，ELSD的響應不依賴與樣品的光學特性，任何揮發性低于流動相的樣品均能被檢測，不受其官能團的影響。靈敏度比示差折光檢測器高，對溫度變化不敏感，基線穩定，適合與梯度洗脫液相色譜聯用。

光電二極管陣列檢測器（photodiode array detector，PDAD）又稱快速掃描紫外可見分光度計，是一種新型的光吸收檢測器。它采用光電二極管陣列作為檢測元件，形成多通道并行工作,同時它對光柵分離的所有波長的光信號進行檢測，然后將其入射到陣列接收機，然后快速掃描二極管陣列來采集數據,得到吸收值(A)是保留時間(tR)和波長(L)函數的三維色譜光譜圖。由此可及時觀察與每一組分的色譜圖相應的光譜數據，從而迅速決定具有選擇性和靈敏度的波長。計算機化的數據處理，還可進行色譜峰光譜相似性比較、峰純度檢測及利用譜圖庫對樣品進行檢索等，為定性、定量分析提供更豐富的信息。

單光束二極管陣列檢測器，光源發出的光先通過檢測池，透射光由全息光柵色散成多色光，射到陣列元件上，使所有波長的光在接收器上同時被檢測。陣列式接收器上的光信號用電子學的方法快速掃描提取出來，每幅圖像僅需要10 ms，遠遠超過色譜流出峰的速度，因此可隨峰掃描。