高效液相色譜儀的流動相和固體相哪個極性大

根據流動相和固定相相對極性不同，液相色譜分為正相色譜和反相色譜。流動相極性大于固定相極性的，稱為反相色譜。固定相極性大于流動相極性的，稱之為正相色譜。
高效液相色譜儀的系統由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統，樣品溶液經進樣器進入流動相，被流動相載入色譜柱(固定相) 內，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數，在兩相中做相對運動時，經過反復多次的吸附- 解吸的分配過程，各組分在移動速度上產生較大的差別，被分離成單個組分依次從柱內流出，通過檢測器時，樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀，數據以圖譜形式打印出來。
原理：分配系數與組分、流動相和固定相的熱力學性質有關，也與溫度、壓力有關。在不同的色譜分離機制中，K有不同的概念：吸附色譜法為吸附系數，離子交換色譜法為選擇性系數　（或稱交換系數），凝膠色譜法為滲透參數。但一般情況可用分配系數來表示。
在條件（流動相、固定相、溫度和壓力等）一定，樣品濃度很低時（Cs、Cm很小）時，K只取決于組分的性質，而與濃度無關。這只是理想狀態下的色譜條件，在這種條件下，得到的色譜峰為正常峰；在許多情況下，隨著濃度的增大，K減小，這時色譜峰為拖尾峰；而有時隨著溶質濃度增大，K也增大，這時色譜峰為前延峰。因此，只有盡可能減少進樣量，使組分在柱內濃度降低，K恒定時，才能獲得正常峰。
色譜：（high performance liquid chromatography,HPLC）也叫高壓液相色譜（high pressure liquid chromatography）、高速液相色譜（high speed liquid chromatography）、高分離度液相色譜（high resolution liquid chromatography）等或Efficient liquid chromatographyspectrometry。是在經典液相色譜法的基礎上，于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發展起來的。它與經典液相色譜法的區別是填料顆粒小而均勻，小顆粒具有高柱效，但會引起高阻力，需用高壓輸送流動相，故又稱高壓液相色譜。又因分析速度快而稱為高速液相色譜。
高效液相色譜是目前應用最多的色譜分析方法，高效液相色譜系統由流動相儲液體瓶、輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器和記錄器組成，其整體組成類似于氣相色譜，但是針對其流動相為液體的特點作出很多調整。HPLC的輸液泵要求輸液量恒定平穩；進樣系統要求進樣便利切換嚴密；由于液體流動相粘度遠遠高于氣體，為了減低柱壓高效液相色譜的色譜柱一般比較粗，長度也遠小于氣相色譜柱。HPLC應用非常廣泛，幾乎遍及定量定性分析的各個領域。
使用高效液相色譜時，液體待檢測物被注入色譜柱，通過壓力在固定相中移動，由于被測物種不同物質與固定相的相互作用不同，不同的物質順序離開色譜柱，通過檢測器得到不同的峰信號，最后通過分析比對這些信號來判斷待測物所含有的物質。高效液相色譜作為一種重要的分析方法，廣泛的應用于化學和生化分析中。高效液相色譜從原理上與經典的液相色譜沒有本質的差別，它的特點是采用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測器和高效微粒固定相，適于分析高沸點不易揮發、分子量大、不同極性的有機化合物。
主要類型：

液固吸附色譜：
分離原理 液固色譜是基于各組分吸附能力的差異進行混合物分離的，其固定相是固體吸附劑。
固定相 ；吸附色譜固定相可以分為極性和非極性兩大類。
流動相 ；流動相要求：選用的溶劑應當與固定相互不相溶，并能保持色譜柱的穩定性。選用的溶劑應有高純度，以防所含微量雜質在柱中積累，引起柱性能的改變。選用的溶劑性能應與所使用的檢測器相匹配，如果使用紫外吸收檢測器，就不能選用在檢測波長下有紫外吸收的溶劑；若使用示差折光檢測器，就不能用梯度洗脫。選用的溶劑應對樣品有足夠的溶解能力，以提高測定的靈敏度。選用的溶劑應具有低的黏度和適當低的沸點。應盡量避免使用具有顯著毒性的溶劑，以保證工作人員的安全
應用：液固色譜是以表面吸附性能力為依據的，所以它常用于分離極性不同低的化合物，也能分離那些具有相同極性基團，但數量不同的樣品。

液液分配色譜：
分離原理 ；分配色譜法的原理與液液萃取相同，都是分配定律。
固定相 ；分配色譜固定相由兩部分組成，一部分是惰性載體，另一部分是涂漬在惰性載體上的固定液。
流動相 ；分內色譜中，要求流動相盡可能不與固定液互溶。
應用 ；既能分離極性化合物，又能分離非極性化合物。由于不同極性鍵合固定相的出現，分離的選擇性可得到很好的控制。

鍵合相色譜：
分離原理 ：正鍵合相色譜分離遠離：使用的是極性鍵和固定性，溶質在此類固定相上的分離機理屬于分配色譜。
反鍵合相色譜分離原理：使用的是極性較小的鍵合固定相，其分離機理可用疏溶劑作用理論來解釋。
固定相 ；按極性大小可分為非極性、弱極性、極性化學鍵合固定相三種。
流動相：正鍵合相色譜中，采用和反相液液分配色譜相似的流動相，流動相的主體成分為己烷或庚烷。反相鍵合相色譜中，流動相采用和反相液液分配色譜相似的流動相，主題為水。
應用：正鍵合相色譜法的應用：多用于分離各類極性化合物如染料、炸藥、多巴胺、氨基酸等；反鍵合相色譜法的應用：由于操作簡單，穩定性和重復性好，該方法已成為一種通用型液相色譜分析方法。在生物化學、醫藥研究、食品分析和環境污染分析等多個領域有了很大的應用和發展。

凝膠色譜：凝膠色譜又稱分子排阻色譜，它是按照分子尺寸大小順序進行分離的一種色譜方法。凝膠色譜法的固定相凝膠是一種多孔性的聚合材料，有一定的形狀和穩定性。根據所用流動相的不同，凝膠色譜法可以分為兩類：即用水溶劑做流動相的凝膠過濾色譜法（GFC）與用有機溶劑如四氫呋喃做流動相的凝膠滲透色譜法（GPC）。