高效液相色譜儀流動相概述

根據流動相所起的作用，高效液相色譜儀流動相可分為底劑和洗脫劑。底劑決定基本的色譜分離情況，洗脫劑是為了調節樣品組分的滯留并對某幾個組分具有選擇性的分離作用。流動相又稱洗脫劑、淋洗液、展層劑或溶劑。

一、流動相選擇的一般要求：

1、流動相的純度。

2、流動相與固定相不互溶，不發生化學反應。

3、對樣品要有適宜的溶解度。

4、必須與檢測器匹配。

5、溶劑的粘度要小，以降低色譜柱的阻力。

二、常用溶劑的極性順序：

水＞甲酰胺＞乙腈＞甲醇＞乙醇＞丙醇＞丙酮＞二氧六環＞四氫呋喃＞甲乙酮＞正丁醇＞乙酸乙酯＞異丙醚＞二氯甲烷＞氯仿＞溴乙烷＞苯＞二硫化碳＞環己烷＞己烷＞煤油。

三、流動相的選擇：

1、化學鍵合相色譜：

（1）正相鍵合相色譜：

常用非極性溶劑，樣品組分的保留值可加入適當的有機溶劑（調節劑）調節。

常用溶劑：氯仿、二氯甲烷、已腈和醇類等。

（2）反相鍵合相色譜：

多以水或無機鹽緩沖液為主體，再加入一種能與水相溶的有機溶劑調節，如甲醇、乙睛和四氫呋喃等。

2、離子交換色譜：

離子交換色譜是在含水介質中進行。組分的保留值可用流動相中鹽的濃度（或離子強度）和PH值控制，增加鹽的濃度，保留值降低。

3、凝膠色譜：

凝膠色譜所用的溶劑必須與凝膠本身非常相似，能潤濕凝膠并防止吸附作用。

高分子有機化合物的分離采用的溶劑主要有四氫呋喃、甲苯、間甲苯酚和N，N-二甲基甲酰胺等。

生物物質的分離主要用水、緩沖鹽溶液、乙醇和丙酮等。