六味地黃丸的配方為:160克地黃,80克山楂,60克牡丹,80克山藥,60克枸杞子和60克澤瀉。中國藥典2015年采用高效液相色譜儀測定了馬皂苷和牡丹皮中丹皮酚的含量。
摘要:六味地黃丸處方為:舒地160g、山茱萸80g、牡丹皮60g、山藥80g、茯苓60g、澤瀉60g,用高效液相色譜儀測定山茱萸、牡丹皮中的羅丹寧、丹皮酚的含量。IA 2015版。
總結了鹿味地黃丸的測定方法。
1. 2015年“中國藥典”中六味地黃丸含量的測定:
山茱萸:
色譜條件及系統適用性試驗:十八烷基硅烷鍵合二氧化硅為填料;四氫呋喃-乙腈-甲醇-0.05%磷酸溶液(1:8:4:87)為流動相;檢測波長236nm,柱溫40根據洛格寧的峰值,理論塔板數不少于4000個。
試液制備:本品蜂蜜丸或谷子丸切絲,取0.7g左右,準確稱重;或在重量差試驗項目下,切0.1g左右,精密稱重,放入錐形瓶,精密度加50%甲醇25 ml,填塞,稱重,超聲波萃取(功率250 W,頻率33 kHz)15 min,冷卻后加入50%甲醇失重,搖勻,過濾。取10 ml濾液,置于中性氧化鋁柱(100×200目,4g,內徑1cm,干式填料柱)上。濾液用40%甲醇溶解,轉至容量為10 ml的容量為50%的容量瓶中。稀釋甲醇成垢,搖勻制得。
牡丹皮
色譜條件和系統適用性試驗:以18烷基硅烷和硅膠為填料,甲醇水(70:30)為流動相,檢測波長為274 nm。根據單寧的峰值,理論塔板數不應少于3,500。
樣品溶液制備:取蜜丸或小蜜丸,切碎,取約0.3g,精密稱取;或取重量差檢測的大蜜丸,切約0.4g,準確稱取,加50%甲醇50ml,塞重50ml,超聲提取(功率250w,頻率33 kHz)45分鐘,冷卻,再次稱重,使用5.4 g.0%甲醇,搖勻,過濾,過濾。
二、以單皮酚為指標
采用SpeARC法測定六味地黃丸中丹皮酚的含量。高效液相色譜儀(HPLC)為Waters 2695。色譜柱為超視距2(205 mm×4.6mm,5um),流動相為甲醇-2%乙酸(55:45),流速1.0ml·min,檢測波長275 nm,溫度25℃。樣品用甲醇提取,用Sep-Pak C 18柱處理.可回收12×14 mL廢水。
采用薄層掃描法測定六味地黃丸中丹皮酚的含量。使用Shimadzu CS-910雙波長薄層掃描儀。色譜條件:硅膠G板;顯影溶劑:環己烷-氯仿無水乙醇7或3:1。薄層掃描條件:反射鋸齒掃描,波長s = 274nm,r = 365nm;掃描速度20毫米/分鐘;切口1.25 * 1.25毫米; sx = 3.用無水乙醇回流提取樣品。
采用差示分光度法測定六味地黃丸中丹皮酚的含量。采用島津UV2240分光光度計和751g分光光度計。采用乙醇提取法提取樣品,缺少丹皮酚的樣品為空白樣品。用蒸餾水和0.01mol/L氫氧化鈉溶液調節體積。測量波長為352納米,參考波長為370納米。
采用電動毛細管色譜法測定了牡丹和六味地黃丸中丹皮酚的含量。定量測定采用內標法,內標物為蘆丁。單毛細管電泳公司毛細管為55 cm,有效長度為50 cm×75 um。檢測波長為274 nm,電壓為15 kV,背景電解質為30 mmol/LSD 30 mmol/L硼砂,20 mmol/LSD 50 mmol/L硼砂pH值為9.4。樣品溶液的制備:用95%乙醇超聲提取牡丹皮,粉碎六味地黃丸后,加入5克硅藻土色譜載體,40目60目,均勻、干燥、無水乙醇。六味地黃丸粉碎后,加入5g硅藻土色譜載體,60目40目,無水乙醇均勻干燥。
采用近紅外光譜法測定六味地黃丸中丹皮酚的含量。樣本數據由偏最小二乘PLS,主成分分析 - BP神經網絡和小波變換 - BP神經網絡處理。
以正十六烷為內標,用毛細管氣相色譜法測定六味地黃丸中丹皮酚的含量。日本島津GC-9A氣相色譜儀。柱體為28m*0.28mm,5um,涂SE-300.26um,氮氣流速為60ml/min,氫氣流速為50ml/min,空氣流速為500ml/min,柱溫“180~C,化油器和檢測器為320~C,取樣:六味地黃丸經乙醇超聲處理精制,中性氧化鋁柱為治療。錳,100-200目,10 g和11 mm。收集并濃縮乙醇洗脫液。
三、油酸或醇酸作為指示劑。
采用高效液相色譜儀測定六味地黃丸(濃縮丸)中熊果酸的含量。柱為Alltimac 185,流動相為甲醇 - 水(80:20),流速為0.5ml / min。 ELSD檢測器的漂移管溫度為80°C。將樣品與BMI一起回流。
采用高效液相色譜儀測定了六味地黃丸和六味地黃膠囊中的紫墩和熊果酸含量。高效液相色譜儀為Shimadzu LC-10ad;Shim-Pack C18柱,4.6 mm x 150 mm,5微米;流動相為乙腈-甲醇-水-乙酰胺70:16:14:0.5;流速1 ml/min,檢測波長215 nm;室溫為柱溫。樣品處理方法:將六味地黃丸(濃縮丸)溶于水中過濾,用乙烯萃取,加熱回流。將殘余物浸入石油醚(30-60℃)中,丟棄石油醚溶液。殘渣溶解在甲醇中,并補充體積。
四、以馬錢素為指標
采用反相高效液相色譜法(RP-HPLC)測定六味地黃丸中降鈣素的含量。流動相為甲醇-水(1∶4),流速為0.8ml/min,檢測波長為238nm。流動相為甲醇-水(1∶4),流速為0.8ml/min,檢測波長為238nm。用甲醇超聲提取樣品。
五、多糖、梓醇等
用苯酚-硫酸法測定六味地黃丸中多糖的含量。樣品溶液制備:精確稱取1 g六味地黃丸粉,用80%乙醇加熱回流,過濾,80%熱乙醇洗滌,蒸餾水和熱蒸餾水洗滌,蒸餾水和水體積測定。濾液。水。
薄層掃描法測定六味地黃丸中梓醇的含量。薄層條件有:硅膠G板、顯影劑氯仿甲醇水(7:3:0.5)、碘蒸氣顏色。薄層掃描條件:單波長反射鋸齒掃描,掃描波長350納米,狹縫1.2毫米,1.2毫米,SX/3。
采用D 101大孔吸附樹脂處理六味地黃丸,用80%乙醇純化六味地黃丸。用50毫升水洗脫,用50毫升20%甲醇洗脫。聯合洗脫液濃縮。
采用毛細管區帶電泳法測定山楂和六味地黃丸中沒食子酸的含量,以肉桂酸為內標。毛細管規格為60cm有效長度45cm×75μm,檢測波長271nm,電壓20kV,背景電解質20mmol / L硼砂,重力注入10cm×5s,電泳溫度20℃,沖洗3分鐘。在每次手術前,使用0.1mol / L NaOH溶液,去離子水和運行緩沖液。六味地黃丸用95%乙醇處理。