高效液相色譜儀紫外吸收檢測器概論

紫外吸收檢測器是高效液相色譜儀中使用最廣泛的檢測器。

一、工作原理：

紫外吸收檢測器是基于朗伯-比耳定律，根據被測組分對紫外光或可見光具有吸收，且吸收強度與組分濃度成正比的關系進行檢測。

二、結構：

由光源、分光系統、樣品池和檢測系統等組成。

三、類型：

1、固定波長紫外吸收檢測器：

由低壓汞燈提供固定波長 254nm（或 280nm）的紫外光經入射石英棱鏡準直，再經遮光板分為一對平行光束分別進入流通池的測量臂和參比臂。經流通池吸收后的出射光，經過遮光板、出射石英棱鏡和紫外濾光片，只讓 254nm 的紫外光被雙光電池接收，光強度經對數放大器轉化成吸光度后輸送至記錄儀。

為減少死體積，流通池的體積很小，僅為 5～l0uL，光路約 5～10mm，常采用H形結構。

2、可變波長紫外吸收檢測器：

光源波長選擇可任意可調，應用非常廣泛。

（1）可選擇組分的最大吸收波長作為檢測波長，提高檢測靈敏度。

（2）可選擇組分有強吸收而干擾無吸收的波長進行檢測，提高分析的選擇性。

（3）梯度洗脫時，可選擇流動相改變而其吸光度不變的波長進行檢測，有利于梯度洗脫。

（4）可選擇的波長范圍很大，既提高檢測器的選擇性，又可選用組分的最靈敏吸收波長進行檢測，提高檢測靈敏度。

（5）具有有停流掃描功能，可繪出組分的光吸收譜圖，以進行吸收波長的選擇。

3、光電二極管陣列檢測器：

屬于多波長快速掃描紫外吸收檢測器，是高效液相色譜儀最有發展前途的檢測器。

四、特點：

1、應用廣泛。

2、靈敏度高。

3、線性范圍寬。

4、對流動相的溫度和流速變化不敏感。

5、適于梯度洗脫。

五、不足：

1、只能用于檢測能吸收紫外光的組分。

2、溶劑要選用無紫外光吸收的物質。

3、紫外光不透過的溶劑不能檢測（如苯等）。

六、應用：

對大部分有機物有響應。