高效液相色譜儀色譜柱的保養

       正常情況下，高效液相色譜儀色譜柱至少可以使用3～6個月，能完成數百次分離。但若操作不慎，將很容易損壞色譜柱而不能使用。因此為了保持柱效、柱容量和滲透性，必須對色譜柱進行仔細保養。

一、色譜柱的保護：

  1、流動相和樣液都需用0.45um孔徑的濾膜過濾。

  2、加3～5cm保護柱。

  3、進樣閥進樣。

  4、用純甲醇保存色譜柱，防止細菌生長。

  5、防止過酸或過堿。

  6、防止振動和逆向流動。

  7、對硅膠基鍵合相，水溶液流動相的PH值不得超出2～8.5的范圍，使用溫度不宜過高。

  8、色譜柱在酸性或堿性條件下使用后，應依次用水和甲醇清洗。對暫時不用而需要較長時間保存的色譜柱，要用純甲醇清洗。

  9、色譜柱兩端用金屬螺帽封閉，保存在干凈的有機溶劑中。

二、色譜柱的再生：

        一般情況下，硅膠和ODS等化學鍵合固定相再生是困難的。有時采用下述方法可能提高柱效。

  1、由于雜質微粒等因素，使色譜柱上端固定相變色，柱效下降。這時，可仔細地將變色部分除去約3mm左右，再補充新的固定相。

  2、當色譜柱吸附未被洗脫的成分時，柱效將明顯下降，可選擇合適的溶劑洗凈。

  3、當采用梯度洗脫時，色譜柱在重復使用前，用泵把幾倍于柱體積的起始溶劑壓經色譜柱，以重新建立起始的平衡來得到再生。