高效液相色譜儀色譜柱的填料：
在填料和流動相之間進行液相色譜柱分離。液相色譜柱的分類取決于填料的類型。
正相柱：硅膠主要用作柱填料。按形狀可分為無定形和球形兩種，其粒徑在3-10um之間另一種正相填料是硅膠表面鍵合-CN，-NH2等官能團即所謂的鍵合相硅膠
反相柱：硅膠表面結合十八烷基官能團（ods）的非極性填料。也有無定形和球形的差異。其他常用的反填料有粘結的C8、C4、C2、苯基等，粒徑在3-10um之間。
高效液相色譜儀正相色譜柱的使用方法：
新立柱可直接用于流動相建議用正己烷乙腈（99:1）在0.5ml/min流速下沖孔10倍柱體積然后根據流動相選擇極性相近的氯仿或二氯甲烷在相同流速下沖孔10倍柱體積后用流動相代替流動相。
當采用正相時，不適合分析含有醛固酮和羰基的化合物，不應用于還原糖的分析。流動要完全汽化，不能含有羰基化合物和過氧化物(質量較差的乙醚和少量四氫呋喃)。
無論何時更換流動相，都必須確保新的流動相和柱的原始保存液是相互溶解的。