高效液相色譜入門基礎知識之高壓輸液泵

　　高壓輸液泵是液相色譜儀的關鍵部件，其作用是將流動相以穩定的流速或壓力輸送到色譜系統。對于帶在線脫氣裝置的色譜儀，流動相先經過脫氣裝置再輸送到色譜柱。輸液泵的穩定性直接關系到分析結果的重復性和準確性。

     高效液相色譜儀的結構

高效液相色譜儀由高壓輸液系統、進樣系統、分離系統、檢測系統、記錄系統 等五大部分組成。分析前，選擇適當的色譜柱和流動相，開泵，沖洗柱子，待柱子達到平衡而且基線平直后，用微量注射器把樣品注入進樣口，流動相把試樣帶入色譜柱進行分離，分離后的組分依次流入檢測器的流通池，最后和洗脫液一起排入流出物收集器。當有樣品組分流過流通池時，檢測器把組分濃度轉變成電信號，經過放大，用記錄器記錄下來就得到色譜圖。色譜圖是定性、定量和評價柱效高低的依據。   

   高壓輸液系統

高壓輸液系統由溶劑貯存器、高壓泵、梯度洗脫裝置和壓力表等組成。

(1) 溶劑貯存器。溶劑貯存器一般由玻璃、不銹鋼或氟塑料制成，容量為1～2L，用來貯存足夠數量、符合要求的流動相。

(2) 高壓輸液泵。高壓輸液泵（圖3-1-3）是高效液相色譜儀中關鍵部件之一，其功能是將溶劑貯存器中的流動相以高壓形式連續不斷地送入液路系統，使樣品在色譜柱中完成分離過程。

由于液相色譜儀所用色譜柱徑較細，所填固定相粒度很小，因此，對流動相的阻力較大，為了使流動相能較快地流過色譜柱，就需要高壓泵注入流動相。對泵的要求：輸出壓力高、流量范圍大、流量恒定、無脈動，流量精度和重復性為0.5%左右。此外，還應耐腐蝕，密封性好。高壓輸液泵，按其性質可分為恒壓泵和恒流泵兩大類。恒流泵是能給出恒定流量的泵，其流量與流動相粘度和柱滲透無關。恒壓泵是保持輸出壓力恒定，而流量隨外界阻力變化而變化，如果系統阻力不發生變化，恒壓泵就能提供恒定的流量。

　　 高壓液相色譜儀對高壓輸液泵的基本要求如下：

　　流量準確可調

　　對一般的分析工作而言，流動相的流速在0.5~2mL/min，輸液泵的最大流量一般為5~10mL/min。輸液泵的流量控制精度通常要求小于±0.5%。輸液泵必須能精確地調節流動相流量，這樣可以通過電子線路調節電極轉速或沖程長短來實現。流量的測定通常采用熱脈沖流量計。

　　耐高壓

　　高效液相色譜柱是將很細顆粒的填料，在高壓下填充到柱管中，為了保證流動相以足夠大的流速通過色譜柱，需要足夠高的柱前壓。通常要求泵的輸出壓力達到30~60MPa的高壓。

　　液流穩定

　　輸液泵輸出的液流應無脈動，或配套脈沖抑制器。

　　泵的死體積小

　　為了快速更換溶劑和適于梯度洗脫，泵的死體積通常要求小于0.5mL。泵的結構材料應耐化學腐蝕。