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  • 發布時間:2020-01-04 17:43 原文鏈接: 高效液相色譜分析法的類型

    高效液相色譜分析法的類型:

    1.正相分配色譜

    正相分配色譜適用于不溶于水溶于有機溶劑中具有極性基團的樣品,而正相分配色譜不適用于離子物質..

    2.反相分配色譜

    該方法廣泛應用于反相分配色譜。樣品的非極性部分起著保留作用。

    在流動相中加入不同量的甲醇或乙腈可以調節分離,但如果樣品含有離子基團,則需要在流動相中加入鹽或調節流動相的PH值。例如,當樣品中含有α-COOH基團時,流動相的PH值是酸性的,并通過抑制-COOH基團的電離來增強保留。這種方法叫做離子抑制法。如果樣品具有強的離子基,有時采用在流動相中加入適當的反離子形成離子對的離子對方法。

    在調整PH值時,應將PH值保持在包裝手冊規定的范圍內。大多數化學鍵合二氧化硅用于PH=2-9然而,當加入鹽時,使其PH=7.5-8或更小,多孔聚合物填料可廣泛應用于PH中。該方法利用填料固定相離子交換基團與樣品離子基團之間的離子交換作用分離樣品組分。根據交換離子的不同,可分為陽離子交換和陰離子交換。

    離子交換色譜法用于可溶于水中的離子物質在離子交換色譜中,流動相的鹽濃度、ph值和鹽的種類對保留值有很大的影響磷酸鹽、乙酸鹽和硼酸鹽用于高效液相色譜中的離子交換。因為氯化物會腐蝕不銹鋼儀器,所以不能在高效液相色譜中使用氯化鈉或其他氯鹽。有些鹽不能根據測量波長使用。例如,乙酸的吸收波長約為210 nm。當檢測處于短波端時,不宜以乙酸為流動相。凝膠色譜法不同于上述三種方法。用凝膠色譜法根據分子大小分離樣品組分。這種方法也稱為排阻色譜法或粒徑排阻色譜法具有一定孔徑的多孔合成聚合物經常用作填料。

    因為在樣品中,小分子深入微孔,所以流出晚,而大分子不進入微孔,所以流出快。通常,有機溶劑被用作分離合成樹脂的流動相,其被稱為凝膠滲透色譜法。

    凝膠色譜樣品的性質可分為凝膠滲透和凝膠過濾。

    1.凝膠滲透色譜

    凝膠滲透色譜法,簡稱GPC。這種色譜法用于pvc、ps、abs等有機溶劑樣品,所用的洗脫劑為四氫呋喃、氯仿等。

    2.凝膠過濾色譜

    凝膠過濾色譜(凝膠過濾色譜),簡稱GFC這種色譜法用于蛋白質、淀粉、水性合成聚合物等水溶劑的試劑,所用溶液為水、緩沖液等。

    凝膠有多種,根據其原料來源可分為有機膠和無機膠粘劑按其制備方法可分為均勻、半均勻和非均勻三種凝膠根據凝膠的強度,可分為三類:軟膠、半硬質橡膠和硬膠。根據其適用性,溶劑可分為親水性、親脂性和兩性凝膠。


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