個人建議：
1、改變流動性比例，可同時調整流速，減少進樣量。
2、減少有機相比例，例如50%乙腈可改成40%、30%等，注：研發時可用。
3、改用四元高壓梯度洗脫
4、更換色譜柱
分離不好有很多原因,可以先試試減少時樣量.最好先從流動相入手比較好解決!!最常用的就是調PH.
改變流動相比例是最好的方法。
換梯度洗脫，更換分離效果好的柱子
先分析樣品的極性，然后選擇相應的流動相和色譜柱，通過流動相的比例、流速、柱箱溫度調節分離樣品。如果不是單泵，可以做梯度洗脫，調節不同時間的流動相比例，這樣既可以達到好的分離效果，又縮短分析時間。