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  • 發布時間:2022-11-23 13:27 原文鏈接: 高效液相色譜柱在作樣前和作樣后如何平衡

    一般說的液相色譜柱多指的是反相色譜柱。反相色譜柱比如C18、C8、苯基柱等等。
    這些柱子保存在有機相中,比如甲醇、乙腈里面比較好,所以封存的時候大多用甲醇或者乙腈封存色譜柱。而反相的流動相大多數都是緩沖鹽的溶液,這些無機鹽溶液在純有機相中容易析晶,所以中間會有一個10%的甲醇水(或乙腈水)作為緩沖。
    所以每次使用前:先用1.0ml/min的流速沖洗30min的10%甲醇水,然后上流動相平衡,大約30min基線跑平了就可以進樣了。
    每次使用后:同樣沖洗30min的10%甲醇水,把流動相里面的緩沖鹽沖洗掉,然后用甲醇沖洗30min封存。
    其中的30min是大約10倍的色譜柱柱體積,針對的是比較常見的250mm*4.6mm內徑的柱子,如果你用的是使用的是150mm或者100mm的短柱,可以根據柱長和柱內徑計算柱體積。πr^2*柱長。

    如果色譜柱是正相,因為正相色譜的流動相里沒有無機鹽,所以就沒有中間那個過渡了。可以直接沖洗流動相進行平衡了。使用結束之后直接用規定的正相溶液封存就可以了。

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