高效液相色譜法與經典液相色譜法的主要區別

一、類型不同

1、高效液相色譜法

1）吸附色譜法(Adsorption Chromatography)

2）分配色譜法(Partition Chromatography)

3）離子色譜法(Ion Chromatography)

4）分子排阻色譜法/凝膠色譜法(Size Exclusion Chromatography)

5）鍵合相色譜法（bonded-phase chromatography）

6）親和色譜法(Affinity Chromatography)

2、經典液相色譜法

1）吸附色譜法

吸附色譜法的固定相為吸附劑，色譜的分離過程是在吸附劑表面進行的，不進入固定相的內部。

2）分配色譜法

這種色譜的流動相和固定相都是液體，樣品分子在兩個液相之間很快達到平衡分配，利用各組分在兩相中分配系數的差異進行分離，類似于萃取過程。

3）離子交換色譜

離子交換色譜通常用離子交換樹脂作為固定相。一般是樣品離子與固定相離子進行可逆交換，由于各組分離子的交換能力不同，從而達到色譜的分離。

二、特點不同

1、高效液相色譜法

①高壓：流動相為液體，流經色譜柱時，受到的阻力較大，為了能迅速通過色譜柱，必須對載液加高壓。

②高速：分析速度快、載液流速快，較經典液體色譜法速度快得多，通常分析一個樣品在15～30分鐘，有些樣品甚至在5分鐘內即可完成，一般小于1小時。

③高效：分離效能高。可選擇固定相和流動相以達到最佳分離效果，比工業精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。

2、經典液相色譜法

以液體作為流動相，固定相可以有多種形式，如紙、薄板和填充床等。

三、應用不同

1、高效液相色譜法

由于高效液相色譜法具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復利用，流出組分易收集等優點，因而被廣泛應用到生物化學、食品分析、醫藥研究、環境分析、無機分析等各種領域，并已成為解決生化分析問題最有前途的方法。

2、經典液相色譜法

液相色譜是常溫操作，不受樣品揮發度和熱穩定性的限制，它非常適合相對分子量較大，難汽化，不易揮發或對熱敏感的物質、離子型化合物和高聚物的分離分析，大約占有機物的70%~80%。