1 范圍
建立了高效液相色譜法測定保健食品中茶氨酸含量的方法。
本方法適用于以紅茶、綠茶為主要原料的保健食品中茶氨酸的測定。
2 方法原理
用水提取樣品中的茶氨酸，等度洗脫，高效液相色譜法分離，用紫外檢測器檢測，定量測定峰面積或峰高，用外標法計算結果..
3 試劑
注：除特殊說明外，所用試劑均為分析純。試驗用水滿足GB/T 6682一級用水要求。
三氟乙酸（C F3COOH）：色譜純度。
3.2茶氨酸標準品（CAS）：CAS，純度（＞98%）。
3.3.三氟乙酸水溶液（pH3.0）：取水，加入三氟乙酸至pH3.0。
3.4茶氨酸標準儲備液（3.5 mg/ml）：取茶氨酸標準品35.0 mg（精確至0.1 mg），用水溶解，移入10 ml容量瓶中，用水定容至刻度。
3.5茶氨酸標準品使用液：準確吸收茶氨酸標準儲備液（3.4）0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL，移入10mL容量瓶中，定容至刻度。得到濃度分別為0.07mg/ml、0.14mg/ml、0.21mg/ml、0.28mg/ml和0.35mg/ml的茶氨酸標準溶液。
4 儀器設備
4.1高性能液相色譜儀：配備紫外探測器或二極管陣列檢測器。
4.2 恒溫水浴鍋。
4.3離心機，4000 r/min。
4.4分析平衡：靈敏度1毫克，0.1毫克。
4.5 pH計。
5 分析步驟
5.1固體樣品處理：稱取適量壓碎樣品（精確至0.001 g，相當于10 mg茶氨酸），加水30 ml，在80℃恒溫水浴中加熱40分鐘，冷卻，離心，過濾，轉移至50 ml容量瓶中，水定容至刻度，均勻攪拌。樣品溶液為0.45μm以上的水膜，需進行測試。
5.2液體樣品的處理：取一定量的樣品，在水浴鍋中蒸干，殘渣溶于水，移入10ml容量瓶中，與水定容混合成刻度。溶液通過0.45μm水膜，需要測量。
5.3 色譜參考條件
5.3.1色譜柱：C18色譜柱，5微米，4.6 x 250 mm或相同效果的色譜柱。
5.3.2 檢測波長：203 nm。
5.3.3流動相：三氟乙酸水溶液（3.3）。
5.3.4流速：1.0ml/min。
5.3.5 進樣量：10.0 mL。
5.3.6 柱溫：35 ℃。
5.4 色譜分析
5.4.1標準曲線的制備：標準溶液的標準濃度(3.5)分別為0.07mg/mL、0.14mg/mL、0.21mg/mL、0.28mg/mL、0.35mg/mL。用標準樣品濃度繪制茶氨酸與峰面積的標準回歸曲線。
5.4.2樣品測定：將樣品溶液注入高效液相色譜中，定性測定保留時間和紫外可見吸收光譜，定量測定峰面積。茶氨酸濃度可根據色譜峰面積的標準曲線計算。
6結果計算
6.1試樣中茶氨酸的含量
式中：
X樣溶液中茶氨酸的含量，g≤100 g；
C—試樣溶液中茶氨酸的濃度，mg/mL；
V—試樣定容體積，mL；
m—試樣質量，g。
6.2計算結果表明，計算結果保留了3位有效數字。
計算結果用重復條件下得到的兩個獨立結果的算術平均值表示，計算結果保持三位數的有效數。
7 精密度
在重復條件下獲得的兩個獨立測量值之間的絕對差值不超過算術平均值的10%。
8 其他
這種方法的最低可檢測量：10納克。