糖精鈉俗稱糖精,是廣泛使用的一種人工甜味劑,常用食品如醬菜、冰淇淋、蜜餞、糕點、餅干、面包等均可以糖精鈉作甜味劑,以提高其甜度。糖精鈉的定量分析方法有高效液相色譜法、薄層色譜法、離子選擇電極法及紫外分光光度法等。目前使用較多的是高效液相色譜法。
1、測定原理
試樣加溫除去二氧化碳和乙醇,調pH至近中性,過濾后進高效液相色譜儀,經反相色譜分離后,根據保留時間和峰面積進行定性和定量。
2、試劑
①甲醇 經0.5μm濾膜過濾。
②氨水(1+1) 氨水加等體積水混合。
③乙酸銨溶液(0.02mol/L) 稱取1.54g乙酸銨,加水至1000mL溶解,經0.45μm濾膜過濾。
④糖精鈉標準儲備溶液 準確稱取0.0851g經120℃烘干4h后的糖精鈉(C6H4CONNaSO2 ? 2H2O),加水溶解定容至100.0mL。糖精鈉含量1.0mg/mL,作為儲備溶液。
⑤糖精鈉標準使用溶液 吸取糖精鈉標準儲備液10.0mL放入100mL容量瓶中,加水至刻度。經0.45μm濾膜過濾。該溶液每毫升相當于0.10mg的糖精鈉。
3、儀器
高效液相色譜儀,紫外檢測器。
4、分析步驟
(1)樣品處理
①汽水 稱取5.00～10.00g,放入小燒杯中,微溫攪拌除去二氧化碳,用氨水(1+1)調pH約7。加水定容至適當的體積,經0.45μm濾膜過濾。
②果汁類 稱取5.00～10.00g,用氨水(1+1)調pH約7,加水定容至適當的體積,離心沉淀,上清液經0.45μm濾膜過濾。
③配制酒類 稱取10.0g,放小燒杯中,水浴加熱除去乙醇,用氨水(1+1)調pH約7,加水定容至20mL,經0.45μm濾膜過濾。
(2)高效液相色譜參考條件
①色譜柱 YWG-C184.6mm×250mm 10μm不銹鋼柱。
②流動相 甲醇-乙酸銨溶液(0.02mol/L)(5+95)。
③流速 1mL/min。
④檢測器 紫外檢測器,波長230nm,靈敏度0.2AUFS。
(3)測定 取樣品處理液和標準使用液各10μL(或相同體積)注入高效液相色譜儀進行分離,以其標準溶液峰的保留時間為依據進行定性,以其峰面積求出樣液中被測物質的含量,供計算。
5、結果計算
式中 X1——樣品中糖精鈉含量,g/kg;
m1——進樣體積中糖精鈉的質量,mg;
V2——進樣體積,mL;
V1——樣品稀釋液總體積,mL;
m2——樣品質量,g。
6、討論
①高效液相色譜法取樣量為10g,進樣量為10μL時,最低檢出量為1.5ng。
②允許差:相對相差≤10%。
③本方法糖精鈉回收率為90%～110%。
④用此高效液相分離條件可以同時測定糖精鈉、苯甲酸和山梨酸。
⑤山梨酸的波長為245nm,在此波長下測苯甲酸、糖精鈉靈敏度較低,苯甲酸。
⑥在本實驗條件下,苯甲酸、山梨酸、糖精鈉的出峰時間依、糖精鈉靈敏度波長為230nm。考慮到三種被測組分的靈敏度,采用波長為230nm依次為3.88min,4.70min,7.27min。
⑦所用的移動相中甲醇的量根據不同規格的柱可以作改變,一般在5%～7%之間變化。