高氏I號培養基的制備實驗

實驗方法原理 高氏I號培養基是用來培養和觀察放線菌形態特征的合成培養基。如果加人適量的抗菌藥 物（如各種抗生素、酚等），則可用來分離各種放線菌。此合成培養基的主要特點是含有多種化學成分已知的無機鹽，這些無機鹽可能相互作用而產生沉淀，如高氏I號培養基中的磷酸鹽和鎂鹽相互混合時易產生沉淀，因此，在混合培養基成分時，一般是按配方的順序依次溶解各成分，甚至有時還需要將二種或多種成分分別滅菌，使用時再按比例混合。此外，合成培養基有的還要補加微量元素，如高氏I號培養基中的FeS04 ·7H2O的量只有0.001%，因此在配制培養基時需預先配成髙濃度的FeS04 ·7H2O貯備液，然后再按需加人一定的量到培養基中。

試劑、試劑盒 可溶性淀粉KNO3NaCl瓊脂K2HP04·3H2OMgS04·7H2OFeS04·7H2ONaOHHCl

儀器、耗材 試管三角燒瓶燒杯量筒玻棒培養基分裝器天平牛角匙高壓蒸氣滅菌鍋pH試紙棉花牛皮紙記號筆麻繩或橡皮筋紗布

實驗步驟

一、高氏I號培養基配方

二、器材

1.  溶液或試劑

可溶性淀粉，KNO3，NaCl，瓊脂，K2HPO4 ·3H2O，MgS04·7H2O，FeS04·7H2O，1 mol/L NaOH，1 mol/L HCl。

2.  儀器或其他用具

試管，三角燒瓶，燒杯，量筒，玻棒，培養基分裝器，天平，牛角匙，高壓蒸氣滅菌鍋，pH試紙（pH 5.0-9.0），棉花，牛皮紙，記號筆，麻繩或橡皮筋，紗布等。

三、操作步驟

1.  稱量和溶化

（1）按配方先稱取可溶性溶粉放人小燒杯中，并用少量冷水將淀粉調成糊狀，再加人少于所需水量的沸水中，繼續加熱，使可溶性淀粉完全溶化。

（2）然后再稱取其他各成分依次逐一溶化。

（3）對微量成分FeS04 ·7H2O可先配成高濃度的貯備液按比例換算后再加人，方法是先在100 ml水中 加人1 g的FeS04 ·7H2O配成0.01 g/ml，再在1000 ml培養基中加1 ml的0.01 g/ml的貯備液即可。

（4）待所有藥品完全溶解后，補充水分到所需的總體積。如要配制固體培養基，其溶化過程同牛肉膏蛋白胨培養基制備實驗

2.  pH調節、分裝、包扎、滅菌及無菌檢査

同牛肉膏蛋白胨培養基制備實驗。