摘要建立了高速逆流色譜分離制備防風中有效成分升麻素苷和5-O-甲基維斯阿米醇苷的方法。防風根
的粉末經甲醇浸泡提取和減壓蒸餾,得粗提浸膏。以V( 乙酸乙酯) ∶ V( 正丁醇) ∶ V( 水) = 2∶7∶9 為溶劑,上相為固定相,下相為流動相,流速2. 0 mL/min。從316 mg 防風粗提物中一步分離得到13. 9 mg 升麻素苷和25 mg 5-O-甲基維斯阿米醇苷,純度分別為98. 1%和99. 2%。采用ESI-MS,1H NMR 和13C NMR 對目標化合物的結構進行了鑒定。
關鍵詞高速逆流色譜,防風,升麻素苷,5-O-甲基維斯阿米醇苷
防風Saposhnikovia divaricata( Turcz. ) Schischk. 為傘形科防風屬多年生草本植物,以未抽薹的干燥根入藥,是我國常用大宗中藥材之一。用于治療感冒頭疼、風濕痹痛、風疹瘙癢和破傷風等[1]。2005 年版《中華人民共和國藥典》中,將升麻素苷和5-O-甲基維斯阿米醇苷作為防風的指標成分[1]。現代藥理研究表明,升麻素苷和5-O-甲基維斯阿米醇苷具有解熱、鎮痛、抗炎、抗血小板聚集等多種功效[2,3]。因此建立相關成分的高效分離純化方法具有重要意義。
高速逆流色譜( High-speed counter-current chromatography,HSCCC) 是近年來發展起來的新型、不使用固態支撐體或載體的液液分配色譜技術,克服了固相載體對樣品的吸附損失、變性等缺點,樣品回收率高[4],已被廣泛應用于天然藥物成分的分析鑒定及分離制備[5 ~ 12]。目前,升麻素苷和5-O-甲基維斯阿米醇苷分離純化多采用傳統柱色譜法[13,14]。此方法分離周期長,試劑消耗量大,所用固定相對樣品有不可逆性吸附作用,并且不容易提純。本實驗采用HSCCC 從防風中一步成功地分離純化出升麻素苷和5-O-甲基維斯阿米醇苷,經高效液相色譜峰面積歸一化法( HPLC) 分析,其純度分別為98. 1% 和99. 2%,在短時間內實現了防風中有效成分的高效制備性分離。