摘要: 首次采用高速逆流色譜法對經自制聚酰胺初步分離的表沒食子兒茶素-3-( 3″-O-甲基) 沒食子酸酯( EGCG3″Me) 樣品中的EGCG3″Me 單體進行分離純化。結果表明，選擇水－ 甲醇－ 乙酸乙酯－ 正己烷( 體積比5 ∶ 2 ∶ 9 ∶ 1) 為高速逆流色譜分離的兩相溶劑系統，上相為固定相，下相為流動相，在主機轉速700 r /min、流速2. 0 mL/min、檢測波長254 nm 的條件下，可對EGCG3″Me 實現良好分離。經高效液相色譜檢測，分離純化后的EGCG3″Me 純度可達90%以上，產物的收率為76. 53%。
表沒食子兒茶素-3-( 3″-O-甲基) 沒食子酸酯( EGCG3″Me) 是茶葉中一類甲基化的兒茶素化合物。研究表明，EGCG3″Me 比表沒食子兒茶素沒食子酸酯( EGCG) 、表兒茶素沒食子酸酯( ECG) 、表沒食子兒茶素( EGC) 具有更強的抗過敏和消炎等藥理作用［1 － 2］，在醫學、保健食品開發等領域具有廣闊的應用前景［3 － 4］。目前，EGCG3″Me 分離純化技術研究主要集中于日本，出于知識產權、成果保護等原因，國外未見相關報道。國內已有少量關于茶葉中EGCG3″Me 的研究［5 － 6］，但其分離純化研究較少［7 － 9］，且均基于高效液相色譜( HPLC) 技術。
高速逆流色譜( High speed countercurrent chromatography，HSCCC) 是20 世紀80 年代初發展起來的一種色譜分離純化技術。作為一種液－ 液分配色譜技術，HSCCC 無需固體支撐，克服了固相載體帶來的樣品吸附、損失、污染和峰形拖尾等缺點，可在短時間內實現高效分離［10］。目前，該技術已廣泛應用于天然植物有效成分等的分離純化［11 － 14］。本文通過對HSCCC 的溶劑體系、保留體積、保留時間等工藝條件進行優化，實現了EGCG3″Me 單體的分離純化，可為EGCG3″Me 資源的進一步開發和利用提供參考。