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  • 發布時間:2018-09-18 19:36 原文鏈接: 高速逆流色譜制備分離紫甘薯花色苷

    摘要采用高速逆流色譜法分離純化紫甘薯花色苷。以正丁醇-乙酸乙酯-0. 5% 乙酸( 3∶ 1∶ 4,V/V) 為溶劑體系,上相為固定相,下相為流動相,流速2 mL/min,進樣量300 mg,分離得到兩種花色苷的混合物; 混合物再以0. 2% 三氟乙酸-正丁醇-甲基叔丁基醚-乙腈( 6∶ 5∶ 2∶ 1,V/V) 為溶劑體系,上相為固定相,下相為流動相,流速1. 5 mL/min,進樣量100 mg,分離得到純度分別為98. 5%和96. 7% 的兩個花色苷單體組分。通過紫外-可見光譜、質譜、核磁等技術進行結構鑒定,確定組分1 為3-O-{ 6-O-( E) -咖啡酰-2-O-[6-O-( E) -對羥基苯甲酰-β-D-吡喃葡糖基]-β-D-吡喃葡糖苷} -[5-O-( β-D-吡喃葡糖苷) ]芍藥素,組分2 為3-O-{ 6-O-( E) -咖啡酰-2-O-[6-O-( E) -阿魏酰-β-D-吡喃葡糖基]-β-D-吡喃葡糖苷} -[5-O-( β-D-吡喃葡糖苷) ]芍藥素。實驗從450 g紫甘薯中獲得63 mg 組分1 和48 mg 組分2,為紫甘薯花色苷分離提供了高效、穩定、可靠的方法。

        紫甘薯[Ipomoea batatas ( L. ) Lam.]屬旋花科一年生草本植物。20 世紀90 年代初,日本首先在甘薯中篩選出花色苷含量較高的紫甘薯品種,我國近年來也已著手紫甘薯新品種的選育。研究表明,其塊根富含的花色苷類化合物,具有抗氧化、清除自由基[1,2]、調節血糖[3]、減輕肝功能障礙、促進肝損傷恢復[4,5]、抗突變[6]以及抑菌[7]等多種生理活性。此外,紫甘薯花色苷多具有酰基化結構,穩定性明顯強于其它種類花色苷,具有更好的開發利用前景。目前,關于紫甘薯花色苷上述生理活性的研究結果多來自花色苷粗提物,其作用機理不明確,質量控制也缺少標準品。因此,建立紫甘薯花色苷單體化合物的高效制備技術對進一步作用機理研究及產品質量控制具有重要意義。
        采用紙色譜、薄層色譜、凝膠色譜等多種技術聯用[8,9],可從不同品種紫甘薯中分離出多種花色苷單體,但操作繁瑣、重現性差、易造成目標組分的不可逆吸附和變性,不適于大量制備。高速逆流色譜( HSCCC) 是一種不使用固體吸附劑的液-液分配色譜技術,避免了樣品的不可逆吸附,操作簡單、制備量大,廣泛應用于天然活性成分的制備分離[10 ~ 12]。本研究建立了國產紫甘薯中花色苷高效、快捷、穩定的HSCCC 制備方法,獲得了兩種酰基化花色苷單體,采用紫外-可見光譜、質譜、核磁等技術進行了結構鑒定。


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