摘 要:應用高速逆流色譜法(HSCCC)分離制備了青皮中6種多甲氧基黃酮類( Polymethoxyflavones, PMFs)化合物。以正己烷2乙酸乙酯2甲醇2水(體積比為4∶6∶4∶6)為兩相溶劑系統,在主機轉速800 r /min、流動相流速2mL /min、檢測波長254 nm條件下進行分離制備, 460 min內從270 mg青皮粗提物中一步分離制備得到甜橙素(1, sinensetin) 3. 5 mg, 5, 7, 8, 42四甲氧基黃酮(2) 13. 9 mg,川陳皮素(3,Nobiletin) 51. 3 mg, 3, 5, 6, 7, 8, 3′, 4′2 七甲氧基黃酮(4) 9. 5 mg,橘皮素(5, Tangeretin) 44. 7 mg, 52去甲川陳皮素(6, 52O2DesmethylNobiletin) 11. 2 mg,純度均達97%以上,各化合物結構經質譜和核磁共振氫譜、碳譜鑒定。利用該方法可以對青皮中的黃酮類化合物進行快速的分離和純化。
高速逆流色譜( High2Speed Counter2CurrentChromatography, HSCCC)是利用溶質在兩種互不相
溶的溶劑系統中分配系數的不同,從而進行分離的色譜方法。由于不使用固體支持介質,避免了因與
固體填料發生不可逆吸附造成的樣品損失,使樣品得以全部回收,具有分離容量大、高效、快速的特點,廣泛應用于生物,化學,食品工業等領域。由于該技術具有高承載量,高分離度的特點,適于有效的分離純化傳統中藥當中的活性成分[ 1-3 ] 。
青皮( Pericarpium citri Reticula tae V iride) ,為蕓香科植物橘(Citrus reticulata Blanco)及其栽培變種的干燥幼果或未成熟果實果皮。是《中國藥典》記載的最為常用的傳統中藥植物之一,中醫用煎劑內服治療胸肋脹痛、胃部痞滿、疝氣、食積、乳腫、乳核等癥。青皮中主要含有黃酮、揮發油和少量氨基酸成分,其中黃酮類化合物含量較高。PMFs作為青皮中的抗癌活性成分,對多種癌細胞有較強的抑制作用。最近發現橘皮素具有保護細胞抵抗內質網應激和細胞毒素[ 4 ] ,抑制神經母細胞瘤增殖[ 5 ]等作用。本實驗針對青皮中的黃酮類成分,利用HSCCC從青皮粗提物中分離純化到六種具有生物活性的PMFs。