• <table id="4yyaw"><kbd id="4yyaw"></kbd></table>
  • <td id="4yyaw"></td>
  • 發布時間:2019-09-05 17:22 原文鏈接: 黃曲霉毒素AF的快速檢測技術

    黃曲霉毒素:

    AF是一類化學結構類似的化合物,均為二氫呋喃環和香豆素的衍生物。目前已發現20多種。B1是最危險的致癌物,熒光特性 : 紫外線下 B1B2 發藍色熒光,G1G2發綠色熒光。

     

    黃曲霉毒素AF的快速檢測技術:

    免疫親和柱-熒光分光光度計法和免疫親和柱-HPLC法 。

    (1)分析原理:免疫親和柱試用大劑量的黃曲霉毒素的單克隆抗體固化在水不溶性的載體上,然后裝柱而成。試樣中AF用一定比例的甲醇/水提取,提取液經過過濾稀釋后,用免疫親和柱凈化,以甲醇將親和柱上的黃曲霉毒素淋洗下來,在淋洗液中加入溴溶液衍生,以提高測定靈敏度,然后用熒光分光光度計進行定量。也可以將甲醇-黃曲霉毒素淋洗液的一部分加入HPLC中,對黃曲霉毒素B1B2G1G2分別進行定量分析;

    (2)ELISA法測定黃曲霉毒素B1 原理:將已知抗原吸附在固態載體表面,洗除未吸附抗原,加入一定量抗體與待測樣品提取液的混合液,競爭培養后,在固相載體表面形成抗原抗體復合物,洗除多余抗體成分,然后加入酶標記對抗球蛋白的第二抗體結合物,與吸附在固體表面的抗原抗體復合物結合,再加入酶的底物。在酶催化下底物降解,產生有色物質,通過酶標檢測儀測出酶底物的降解量。推出被測樣品中抗原量。抗體:抗黃曲霉毒素B1的特異性單克隆抗體或抗血清包被抗原:黃B1與載體蛋白結合物,酶標二抗:羊抗鼠IgG與辣根過氧化酶結合物;

    (3)微柱篩選法:原理:樣品提取液通過由氧化鋁與硅鎂吸附劑組成的微柱層析管,雜質被氧化鋁吸附,黃曲霉毒素被硅鎂吸附劑吸附,在波長365nm紫外燈下顯示藍紫色熒光環,其熒光強度與黃曲霉毒素在一定的濃度范圍內成正比例關系.若硅鎂型吸附層未出現藍紫色熒光,則樣品為陰性(方法靈敏度為5~10ug/kg )。由于在微柱上不能分離黃曲霉毒素B1,B2,GI,G2,所以測得結果為總黃曲霉毒素含量。


  • <table id="4yyaw"><kbd id="4yyaw"></kbd></table>
  • <td id="4yyaw"></td>
  • 调性视频