13 0.5mol/l EDTA(pH8.0)溶液
『配制方法』
在800ml水中加入186.1g二水乙二胺四乙酸二鈉,在磁力攪拌器上劇烈攪拌,用NaOH調節溶液的pH值至8.0(約需20g NaOH顆粒)然后定容至1L,分裝后高壓滅菌備用.
〖注意〗EDTA二鈉鹽需加入NaOH將溶液的pH值調至接近8.0,才能完全溶解.
14 溴化乙錠(10mg/ml溶液)
『配制方法』
在100ml水中加入1g溴化乙錠,磁力攪拌數小時以確保其完全溶解,然后用鋁箔包裹容器或轉移至棕色瓶中,保存于室溫,
〖注意〗
溴化乙錠是強誘變劑并有中度毒性,使用含有這種染料的溶液時務必戴上手套,稱量染料時要戴面罩.
15 2×HEPES緩沖鹽溶液
『配制方法』
用總量為90ml的蒸餾水溶解1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2PO4、0.2g葡聚糖和1gHEPES,用0.5mol/l NaOH調節pH值至7.05,再用蒸餾水定容至100ml. 用0.22μm濾器過濾除菌,分裝成5ml小份,貯存于-20℃.
16 IPTG溶液
『配制方法』
IPTG為異丙基硫代-β-D-半乳糖苷(分子量為238.3),在8ml蒸餾水中溶解2g IPTG后,用蒸餾水定容至10ml,用0.22μm濾器過濾除菌,分裝成1ml小份貯存于-20℃.
17 1mol/L乙酸鎂溶液
『配制方法』
在800ml水中溶解214.46g四水乙酸鎂,用水定容至1L過濾除菌.
18 1mol/L MgCl2溶液
『配制方法』
在800ml水中溶解203.4g MgCl2‘’6H2O,用水定容至1L,分裝成小份并高壓滅菌備用.
〖注意〗
MgCl2極易潮解,應選購小瓶(如100g)試劑,啟用新瓶后勿長期存放.
19 β-巰基乙醇(BME)溶液
『配制方法』
一般得到的是14.4mol/L溶液,應裝在棕色瓶中保存于4℃.
〖注意〗
BME或含有BME的溶液不能高壓處理.
20 NBT溶液
『配制方法』
把0.5g氯化氮藍四唑溶解于10ml 70%的二甲基甲酰胺中,保存于4℃.
21 酚/氯仿溶液
『配制方法』
把酚和氯仿等體積混合后用0.1mol/L TriHCl(pH7.6)抽提幾次以平衡這一混合物,置棕色玻璃瓶中,上面覆蓋等體積的0.01mol/l Trisl(pH7.6)液層,保存于4℃.
〖注意〗
酚腐蝕性很強,并可引起嚴重灼傷,操作時應戴手套及防護鏡,穿防護服.所有操作均應在化學通風櫥中進行.與酚接觸過的部位皮膚應用大量的水清洗,并用肥皂和水洗滌,忌用乙醇.
22 苯甲基磺酰氟(PMSF)溶液.
『配制方法』
用異丙醇溶解PMSF成1.74mg/ml(10mmol/L),分裝成小份貯存于-20℃.如有必要可配成濃度高達17.4mg/ml的貯存液(100mmol/L).
〖注意〗
PMSF嚴重損害呼吸道粘膜、眼睛及皮膚,吸入、吞進或通過皮膚吸收后有致命危險。一旦眼睛或皮膚接觸了PMSF,應立即用大量水沖洗之.被PMSF污染的衣物應予丟棄.PMSF在水溶液中不穩定. 應在使用前從貯存液中現用現加于裂解緩沖液中. PMSF在水溶液中的活性喪失速率隨pH值的升高而加快,且25℃的失活速率高于4℃. pH值為8.0時,20μmmol/l PMSF水溶液的半壽期大約為85min,這表明將PMSF溶液調節為堿性(pH>8.6)并在室溫放置數小時后,可安全地予以丟棄.
23 磷酸鹽緩沖溶液(PBS)溶液
『配制方法』
在800ml蒸餾水中溶解8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,用HCl調節溶液的pH值至7.4加水定容至1L,在15lbf/in2(1034×105Pa)高壓下蒸氣滅菌20min. 保存于室溫.
24 1mol/L乙酸鉀(pH7.5)溶液
『配制方法』
將9.82g乙酸鉀溶解于90ml純水中,用2mol/L乙酸調節pH值至7.5后加入純水定容到1L,保存于-20℃.
25 乙酸鉀溶液(用于堿裂解)
『配制方法』
在60ml 5mol/L乙酸鉀溶液中加入11.5ml冰乙酸和28.5ml水,即成鉀濃度為3mol/L而乙酸根濃度為5mol/L的溶液.
26 乙酸鈉(pH5.2和pH7.0)溶液
『配制方法』在80ml水中溶解408.1g三水乙酸鈉,用冰乙酸調節pH值至5.2或用稀乙酸調節 pH值至7.0,加水定容到1L,分裝后高壓滅菌.