5分鐘了解hela細胞形態

　　HeLa細胞通過關閉某些信號通路(包括PI3K和MKK4/MAPK信號通路),激活某些信號通路(包括cAMP、Ca~(2+)—CaM、PKC、Ras和P38/MAPK信號通路),激活或抑制不同的信號分子,使細胞產生具有針對性的細胞效應,包括誘導表達多種特異性蛋白(酶、細胞骨架蛋白、細胞因子等)、改變代謝途徑、減弱某些代謝、加強另一些代謝以及提高胞內運輸能力等,最終使自己可以適應痢疾桿菌的侵襲而生存下去。 為了鑒定在病原菌與寄主細胞相互作用中新的未知的EST序列,我們采用代表約4000個新基因的cDNA微陣列研究了痢疾桿菌入侵前和入侵后3h的人上皮細胞差異表達的新基因,結果共鑒定到≥3倍或≤0.33的差異表達的代表新基因的EST序列76條,然后這些EST序列采用Siclone軟件分析,進行電子延伸,在BLAST比較分析之后,其中25個延伸序列鑒定為與重要的腸道功能相關的已知基因,包括痢疾桿菌-誘導的凋亡(TPPⅡ)、細胞骨架(如actin、talin、cofilin和gelsolin)、離子轉運(calpain-5、Nedd4和Calcium-transporting ATPaseⅠ)、離子通道功能(如ABCA8、TPD52等)、粘膜屏障防御(CLECSF2)、異型生物質代謝以及上皮細胞的保護機制(vof-16)。更為重要性的是,通過RT-PCR克隆并測序,經BLAST搜索,鑒定到3個顯著差異的新的EST序列,并用熒光實時定量RT-PCR實驗證實這三個新序列的確在痢疾桿菌侵襲期間高表達。這三個基因是新的人基因或假基因,其相關信息已提交GeneBank,登錄號為nos.AY776160,AY776161和AY776162。我們認為它們在細胞對痢疾桿菌2457T侵襲反應中起重要的作用。這些結果促進了對痢疾桿菌分子致病機理的認識,也為形成預防和治療痢疾的策略提供了理論基礎。