血清中5'-NT測定主要用于肝膽系統疾病的診斷和骨骼疾病的鑒別診斷。血清中5'-NT活性增高主要見于肝膽系統疾病,如阻塞性黃疸、原發性及繼發性肝癌、肝炎等,通常其活性變化與ALP的活性一致。在骨骼系統疾病中,如腫瘤轉移、畸形性骨炎、甲狀旁腺機能亢進、佝僂病等,ALP活性通常增高,但5'-NT正常。所以ALP和5' -NT同時測定有助于肝膽系統和骨骼系統疾病的鑒別診斷。