5'-NT測定主要用于肝膽系統疾病的診斷和骨骼疾病的鑒別診斷。血清5'-NT活性升高主要見于肝膽系統疾病,如阻塞性黃疸、肝癌、肝炎等,其活性變化與ALP一致。但骨骼系統疾病,如腫瘤轉移、畸形性骨炎、佝僂病、甲狀旁腺功能亢進等,通常ALP活性升高,而5'-NT正常。因此ALP和5'-NT同時測定有助于肝膽和骨骼系統疾病的鑒別診斷。