實驗概要
本實驗介紹了96孔板質粒提取流程。
主要試劑
異丙醇,乙醇
主要設備
96孔板,高速離心機,水浴鍋,通風櫥
實驗材料
重組大腸桿菌
實驗步驟
1. 取lml培養基注板,挑單克隆于96孔板內搖培16-24h;
2. 1500g,離心5min;或4000g,離心3min;
3. 加入200ul溶液I,加牙簽蓋蓋震蕩;
4. 加入200ul溶液II,四邊晃一下,2-3 min(時間不要過久);
5. 加入200ul溶液III,翻轉10次;
6. 沸水浴5 min;
7. 冰浴5 min;
8. 轉移裂解產物約300ul至multi-screen;
9. 2500g,離心5min;
10. 加入200ul異丙醇,翻轉后迅速離心;
11. 4000g,離心15min;
12. 加入300ul70%乙醇清洗,4000g,離心2min,去上清;
13. 吹干后,加水溶解。