ABSCIEX質譜沙龍聯誼會成功舉辦

　　四年的時間里，質譜沙龍活動已經連續舉辦了31期。2011年6月25日，為答謝質譜愛好者、專家、質譜公司以及媒體朋友一直以來對沙龍活動的支持，加強沙龍成員之間的交流，建立一個自由、活躍、高層次的有機質譜一線使用人員交流平臺，由第二炮兵總醫院組織主辦，AB SCIEX公司贊助的質譜沙龍聯誼會活動在順義安利隆山莊成功舉辦。來自北京師范大學質譜中心的謝孟峽教授以及AB SCIEX公司兩位經理在質譜沙龍交流會上做了精彩報告，同大家共同交流、探討了質譜技術在實際工作中的應用情況。

AB SCIEX質譜沙龍聯誼會現場

AB SCIEX公司市場分析經理 彭立新博士

　　交流會活動伊始，來自AB SCIEX公司市場分析經理彭立新博士上臺致辭，彭博士講到：“質譜沙龍活動從2007年成立至今已有4年的時間，期間成功舉辦了三十一期。第一要非常感謝各位老師抽出自己的休息時間積極參與；第二要感謝各位專家的支持；其次還要感謝分析測試百科網，堅持對每期活動進行宣傳報道；最后特別感謝李鵬飛老師和二炮總醫院藥劑科劉麗宏主任的大力支持，使得質譜沙龍越辦越大。今后，希望各位老師能夠更加積極地參與到活動中來，大家一同出謀劃策。AB SCIEX公司也將會一如既往地支持沙龍活動的舉辦。”

第二炮兵總醫院 李鵬飛老師

　　接下來，沙龍活動的組織者來自第二炮兵總醫院的李鵬飛老師帶領大家一同回顧了4年來質譜沙龍活動的發展。

　　質譜沙龍活動回顧

　　舉辦質譜沙龍活動的想法來自于二炮總醫院藥學部的劉麗宏主任和AB SCIEX公司的李丹博士的一次談話，在提到舉辦一個一線質譜技術人員交流的活動時，兩人一拍即合，由二炮醫院組織、AB SCIEX公司贊助。2007年9月22日第一期質譜沙龍活動順利舉行，共有十幾位老師參加，共同討論了沙龍的舉辦模式和主題。到了第四期時，人數已達到30多人，并且分析測試百科網也參與進來并開始對沙龍的長期跟蹤報道。至今，質譜沙龍已成功舉辦了三十一期，活動始終遵循著構建有機質譜一線使用人員交流平臺的宗旨，也堅持做到無償公益的原則。至今已有50余家單位參與，包括醫院、高校、科研院所、國家機關、儀器公司和媒體。活動中一直負責組織、無私奉獻的李老師還由衷地談到自己的感受：通過舉辦沙龍活動，大家互相交流，使得自己在工作中遇到的許多問題得到解決，視野得到開闊。

　　內容及組織形式

　　質譜沙龍的組織形式以專題報告、自由交流、實際問題為主，每期安排3~4個報道。在前三十一期活動中已做了100余篇報告，其中應用方向包括藥物研發、臨床藥代、食品安全、中毒監測、臨床診斷；研究對象為小分子化合物、大分子蛋白、中藥單體/組方；還包括LC-MS技術的操作與維護、新質譜技術、新熱點技術的研討等。

　　李老師也為大家例舉了一些精彩的沙龍報道，如北京生命科學研究所龍承組博士《穩定同位素定量蛋白質組》http://www.antpedia.com/news/67/n-10967.html；西苑醫院中心實驗室林力博士《液質聯用定性研究中藥有效成分的測定方法》http://www.antpedia.com/news/89/n-7989.html；中科院植物所楊芬博士《質譜在植物代謝組學中的應用》http://www.antpedia.com/news/47/n-26847.html；第二炮兵總醫院李鵬飛老師《全譜氨基酸的臨床檢測和短肽檢測方法開發》http://www.antpedia.com/news/41/n-55741-2.html；北京大學分析測試中心周江博士《離子遷移質譜的原理及應用》http://www.antpedia.com/news/41/n-9941.html；華質泰科生物技術有限公司劉春勝博士《DART的原理和應用》http://www.antpedia.com/news/41/n-55741.html；AB SCIEX公司郭立海博士《生物標志物驗證的整體解決方案》http://www.antpedia.com/news/47/n-26847.html。活動中大家相互借鑒、共同學習，集思廣益、博采眾長，匯眾人智、解決難題，使得質譜沙龍成為一個自由、活躍、專業的交流平臺。

　　規劃和展望

　　最后，李老師對未來質譜沙龍活動的舉辦提出了自己的幾點規劃和展望：（1）舉辦更為專業的、高水準的交流報告；（2）實現小分子定量質譜實驗室多中心室間質評；（3）每年舉辦1~2次網絡交流；（4）廣泛的更高層次的技術交流會。質譜沙龍活動舉辦至今，還存在一些不足，有待成長。希望通過更深入廣泛的學習和交流，使得沙龍得到長足的發展。李老師也表示今后希望能夠有更多的老師參與進來！

北京師范大學分析測試中心 謝孟峽教授

　　北京師范大學分析測試中心謝孟峽老師帶來題為《飛行時間質譜法對簽字筆字跡鑒別和形成時間研究》的報告。本課題旨在建立一種針對簽字筆墨水種類和形成時間判定的分析方法。謝老師團隊從事鑒別各種筆跡的課題研究已經有7年多的時間，前幾年的研究已使用到光譜方法、色譜方法，色譜質譜聯用方法等多種實驗方法（具體分析方法見下圖），并已取得了諸多進展。謝老師團隊目前主要的研究采用LDI-TOF飛行時間質譜法鑒別字跡，希望能探索出一種信息量更豐富、同時又不破壞樣品的方法。

鑒別簽字筆筆跡常用分析方法

　　簽字筆在一些重要文件中經常使用，刑事及經濟案件或是民事糾紛常會涉及到被涂改、偽造的文字材料。在無損的情況下，對使用的墨水種類或形成時間進行鑒定仍然是當前法庭科學的一大難題，目前，尚未建立成熟、可靠的系統鑒定方法。

　　簽字筆使用水基的墨水，墨水成分主要是溶劑（主要是水），還有一些添加的成分，如著色劑、樹脂、表面活性劑。著色劑常選用二甘醇、甘油、苯甲醇、苯氧基乙醇、混合溶劑等；一般黑色的簽字筆會添加黑色的染料，藍色的簽字筆就是添加藍色的染料。染料對光特別敏感，易發生光化學作用，因此墨水中染料成分會隨時間的延長而發生改變，應用這一特點可進行字跡形成時間的鑒定。實驗時依據組分不同，在質譜上顯示不同的譜圖特征，來推測簽字的形成時間。

　　激光解吸飛行時間質譜法研究簽字筆墨水字跡識別

　　謝老師研究了40種黑色和5種藍色簽字筆在不同類型空白紙張的LDI-MS實驗，對簽字筆道的激光能量進行了優化，從而保證實驗的重現性，整個實驗未使用基質。通過不同類型空白紙張的LDI-MS實驗，質譜圖顯示空白紙張上主要是含堿性紫3和銅酞菁的熒光染料成分。因此實驗中空白紙張對簽字筆跡的質譜圖就沒有什么影響。簽字筆道的激光能量的優化方法主要從質譜峰強度、分辨率和信噪比三個方面綜合考慮，選擇出40%的激發光能量作為實驗的光強度。選取主要質量數478、450和443的絕對峰面積和主要質量數478和450的相對峰面積進行比較，主要質量數478的相對標準偏差低于1%，而相對峰較弱的質量數450和443的相對標準偏差值也小于7%。證明方法穩定性良好。而同樣的樣品，再隔天采點，在相同儀器參數條件下，質譜的主要質量數的相對峰面積變化很小，證明方法的重現性較好。由此確定了實驗的最優化條件。

　　然后對收集的45種簽字筆進行了數據采集，發現其中有30支黑色簽字筆在正負離子模式下觀察到較強的表面活性劑的質譜信息，謝老師經過大量實驗總結出第一大類的特點是在正或負離子模式下，質譜圖中表面活性劑的特征是成正態高斯分布，相鄰質量數之間差44Da，結合文獻和簽字筆組成資料，判斷含有聚氧乙烯醚結構。

　　而其他10種黑色簽字筆和5種藍色簽字筆卻沒有得到表面活性劑的信息。實驗結果表明利用LDI-MS中不同的質譜信號和即使含有相同質量數但是明顯差異的相對峰強度，不同廠家的10種黑色簽字筆和5種藍色簽字筆可以實現個體識別。

　　HPLC-QTOF MS對簽字筆墨水中染料定性

　　謝老師使用薄層色譜對簽字筆墨水中染料定性。使用甲醇、乙腈或者DMF提取溶解筆跡后，就可以得到不同體系下綜合薄層展開顏色。通過HPLC-QTOF-MS條件下得到的一級質譜和二級質譜圖，就可以確定不同的質荷比峰分別對應的染料名稱，從而對染料定性。

　　LDI-MS法研究簽字筆墨水老化規律

　　字跡形成時間的研究主要考慮染料的降解過程。因此實驗中通過紫外光照射筆跡后，測定峰強度變化，從而做出老化曲線圖，進一步分析各個峰對應的染料的變化情況。然后同樣使用日光燈照射也可以得到相同趨勢的老化曲線圖，但是變化趨勢比較緩。同樣，在自然老化情況下，得到的LDI-MS正離子模式質譜圖和老化曲線圖也表現出了相同的趨勢，但也有一點不同。

　　經過多年的研究，謝老師積累了一定的經驗，取得了很多成果，包括建立了相當可觀的數據庫。謝老師認為今后飛行時間質譜法在古字畫等方面的研究將更具有潛力。

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AB SCIEX公司中國市場部經理蔣宏健先生

　　來自AB SCIEX公司中國市場部經理蔣宏健先生帶來的報告題為《百年質譜話未來》，主要為大家介紹了質譜百年歷史的變遷、質譜發展的未來與方向、以及特色質譜的典型應用。

　　百年質譜發展史

　　蔣經理首先介紹了AB SCIEX公司的基本情況。AB SCIEX公司是由Applied Biosystems公司發展而來，在2010年成為丹納赫旗下的獨立品牌，也是全球唯一一家專注于質譜創新技術的公司。

　　接下來蔣經理帶大家一同回顧了質譜百年發展歷程。1906年J.JThomson在實驗中發現帶電荷離子在電磁場中的運動軌跡與它的質荷比(m/z)有關,并于1912年制造出第一臺質譜儀。隨著時間發展，質譜技術也取得了突破性進展，陸續出現了不同質量分析器的質譜儀，包括雙聚焦質譜、飛行時間質譜、四極桿質譜、離子共振質譜、離子阱質譜以及后來的Orbitrap質譜等；從電離技術來講，包括EI、CI、FI、ESI、APCI、APPI、MALDI等質譜。

　　目前GC/MS(MS)采用的離子源非常成熟，主要是電子轟擊電離源（EI），其次是化學電離源（CI），化學電離時樣品分子與電離電子不直接作用，而是引入大量的反應氣，反應氣被電子轟擊后因離子-分子反應產生一些活性反應離子，這些離子再與樣品分子發生離子-分子反應，使樣品分子實現電離。

　　液質聯用系統中，最常用的就是ESI源。電噴霧技術18世紀早已發現，到1917年真正被提出來，1986年，才實現與質譜結合，成為液質聯用系統中最重要的電離技術。

　　質譜未來發展方向

　　1986年之前，圍繞EI源，科學家們開發出多種接口（如FBI、TD等），試圖將質譜與液相色譜聯用，但是很難成功。1986年之后，SCIEX公司利用電噴霧技術，開發出世界上第一臺商用的基于ESI接口的液質聯用系統（型號為API 3）。液質聯用的出現，不僅滿足小分子和生物大分子、復雜化合物的分析需要，而且滿足各行各業分析需要，如制藥、食品飲料、環境、公安、農業、科研、航空、臨床等。

　　談起質譜的未來發展方向，蔣經理談到幾個方面，包括以下幾點：

　　1、提高靈敏度：質譜的靈魂，目前質譜的靈敏度大概在fmol級，科學家們的目標是使其達到zmol級，那時質譜的用途會更大更廣泛。

　　2、提高選擇性：比如提高質譜的分辨率、使用多級MS

　　3、提高分析速度：質譜的效率

　　4、定性及定量：集合能力，復合技術的組合，定性和定量一個都不能少

　　5、方便易用，智能化，儀器小型化，如采用實時分析技術：解吸電噴霧電離(DESI)技術、DART、NanoMate技術等。

　　AB SCIEX LC/MS/MS典型應用

　　接下來，蔣經理簡單介紹了Qtrap技術用于鑒定牛肉中的抗生素，及用MRM和MRM3掃描對尿液中的鹽酸克倫特羅進行定性和定量分析。

　　利用Triple-TOF質譜技術，采用創新性的準確質量中性丟失掃描模式，對未知物有效鑒定。該技術首先用低能量及高能量的TOF分別掃描，對比兩次掃描結果檢查是否有中性丟失，之后切換到MS/MS掃描。在進行代謝物鑒定時，采用中性丟失掃描，可得到理想色譜圖，很快得到復雜化合物分析結果。

　　在Qtrap 5500/API 5500基礎之上，AB SCIEX公司推出的離子淌度差分質譜可為高靈敏度的定量與定性分析提供更多一維的選擇性，適合分離同分異構體、色譜分離流出的雜質，并消除高背景噪音。

AB SCIEX公司質譜部應用技術支持 李立軍經理

　　接下來來自AB SCIEX公司質譜部應用技術支持李立軍經理為大家帶來的報告題為《QTRAP實戰指南之一——IDA的應用技巧》。

　　首先，李經理先介紹了采用IDA掃描模式的重要性。通常LC-MS定性方法，首先需要用液相色譜將各組分分開，然后通過質譜得到各組分的分子量及碎片信息。這對于不太復雜、比較少的組分，是比較容易實現的，但是如果很多組分同時定性，往往需要做很多遍。再者，以往的多組分同時定量定性分析，采用液相色譜分離及MRM掃描，這時至少兩對MRM，其中一對定量，一對定性，這樣一次最多分析一百多種化合物。

　　對于最新的多組分同時定性定量，采用信息相關掃描方式 （Information Dependent Acquisition）即（IDA）已經在法醫毒物鑒定、中毒搶救和殘留監測中得到成功應用。IDA掃描模式是一種同時定性定量和快速定性方法，其應用也是非常重要的。

　　什么是IDA?

　　IDA采集方法可自動選擇候選離子進行MS/MS 試驗，可根據動態排除能力進行循環試驗，并運用多種預掃描確定進樣MS/MS的候選離子。該技術通常用于代謝物鑒定、藥物毒物以及食品農藥殘留和獸藥殘留的篩查、天然藥物等的鑒定分析。

　　為什么要用IDA?

　　IDA采集模式，一次進樣，可以得到非常多的信息、成倍地提高效率、充分地利用資源。李經理提到，由于通常的MS2靈敏度較低，所以不推薦在QQQ儀器上做IDA，而QTRAP的EPI靈敏度比MS2提高2個數量級以上，所以才能在1-2次掃描中得到高質量的圖譜，能夠進行庫檢索，從而準確定性。而MS2譜與EPI譜差別并不是很大，同樣可進行庫檢索。

　　接下來，李經理列舉出IDA的幾種方式：

　　MRM-EPI：用于高靈敏度的篩查和同時定性定量等

　　EMS-EPI：用于未知物定性，例如藥物代謝物、天然產物鑒定

　　NL/PREC-EPI：適用于代謝物、中藥天然產物的定性，蛋白質翻譯后修飾鑒定

　　EMC-EPI：用于肽、蛋白定性，

　　EMS-ER-EPI：用于肽、蛋白定性，

　　EMS-EPI-MS3：用于未知化合物定性

　　IDA實現方法，是一個循環過程。首先經過MS初篩掃描，進而進行IDA判斷，接下來進行MS/MS數據采集，然后進行動態排除，最后又回到MS初篩掃描。

　　最后，李經理結合實際操作，為大家詳細的介紹了IDA方法的建立以及應用技巧，包括通過軟件向導進行多目標篩查IDA方法的建立、通過采集方法直接建立IDA 試驗、尋找、鑒定代謝產物IDA方法的建立等等。

質譜沙龍聯誼會活動合影

　　交流會結束后，與會者共進晚餐。夜幕降臨，熊熊的篝火燃起，大家歡聚一堂，場面十分熱鬧。

篝火晚會現場