AnalChem│計量院等結合氫氘交換質譜提高cTnI檢測準確性

　　急性心肌梗死（AMI）是全球主要死亡原因之一，心肌肌鈣蛋白I（cTnI）是其首選的生物標志物，被認為是診斷急性心肌梗死的金標準。然而，來自不同試劑制造商的cTnI檢測試劑盒的定量結果可比性差，其標準化已成為近二十年來的全球性難題。據報道，美國食品和藥物管理局（FDA）批準的15種cTnI診斷試劑盒對同一臨床樣品的測試結果，最大差異可達200倍。這種顯著的偏差是由于多種因素導致的，如血液中cTnI存在形式的復雜性，患者內源性抗體的影響以及檢測系統的設計或選擇等。此外，針對不同表位的抗體以及多種抗體之間的相互作用也給測量帶來了潛在的影響。

全文總結圖（圖源自Analytical Chemistry ）

　　2023年1月17日，中國計量科學研究院宋德偉研究員和南京理工大學周敏教授作為共同通訊作者在Analytical Chemistry 發表了題為“ In-Vitro Diagnostic Reagent Evaluation of Commercially Available Cardiac Troponin I Assay Kits Using H/D Exchange Mass Spectrometry for Antibody-Epitope Mapping”的研究論文。該研究結合氫氘交換質譜法，表面等離子體共振分析和表面溶劑可及性分析等方法，針對cTnI開發了一種體外診斷試劑抗體評估策略，以分析診斷試劑抗體的抗原表位，并對抗體雞尾酒（R195，F12，S13）和（D1，D2，pAb2）之間的相互作用進行表征。研究結果表明，抗體識別各種cTnI復合物形式的能力差異是不同制造商試劑定量結果偏差的重要來源，同時抗體自身的親和力也會影響待測抗原的結合能力和效率，抗體的混合使用也存在著對試劑盒識別能力的潛在影響。通過對診斷試劑的抗體識別的表位進行篩選，可以從蛋白質結構的角度進行溯源，提高定量結果的一致性，有助于實現cTnI檢測結果的標準化。

　　由于蛋白質標志物具有結構復雜，活性多變等特點，從結構的角度研究蛋白質標志物的溯源，對提高蛋白類診斷試劑盒定量結果的準確性，促進檢驗結果標準化具有重要意義。這項技術除了可以實現對cTnI試劑盒抗體的快速評估篩選，還可推廣應用于其它蛋白類診斷試劑的設計和開發，快速高通量地篩選擁有高效表位的優質抗體，包括發現生物標志物潛在的適合用于定量的位點，對于提高蛋白類標志物體外診斷試劑的準確性和標準化有著廣闊的應用前景。