C3是補體二條激活途徑的關鍵分子，C3活化后裂解為C3a、C3b兩個片段，C3a很快被血清羧肽酶N裂解為C3adesarg，C3b被H、I 因子滅活為C3bi，經蛋白酶水解為C3c、C3d、C3dg等，檢測這些裂解產物即可反映C3的活化程度。
C3a的定量檢測采用競爭性抑制放射免疫法。其原理為用“I標記C3（I-C3）”與待測樣本、兔抗人C3a多克隆抗體一起孵育，待測樣本中的
C3a（未標記抗原）能競爭性地與抗C3a結合，使C3a復合物（B）增多，而“I-C3”游離出來（F），根據B%來判斷待測樣本中C3a的含量。
1、樣本的采集 EDTA抗凝血漿（EDTA終濃度為l0mmol），2000r/min離心10rain，等量分裝，置-70℃保存待檢。
2、標記抗原的制備 用氯胺T法以125I標記C3純品，制成125I-C3。
3、標記抗原（125I-C3）、兔抗人C3a復合物的制備
取1sCNBr活化的Sepharose4B偶聯I00uL不同稀釋度兔抗人C3a血清，Sepharose 4B用含有10mmol
EDTA、0.3%（W/V）Tween 20pH7.4PBS（PBS-ET）浸泡，加入PBS-ET稀釋的125I-C3
（大約1500cpm）50/uL，室溫16h，反應在2mL聚苯乙烯試管中進行。次日用生理鹽水洗4次，然后測定Sepharose4B放射活性B%。
125I-C3與抗C3a-Sepharose4B的最大結合率為90%。
4、待測樣本中C3a的檢測
將EDTA抗凝血漿或血清與等體積含22%（W/V）PEG的0.1mol/L，pH8.3硼酸鹽緩沖液混合，0℃孵育60rain，2000r/min
離心30min，取上清。選擇上述125I-C3抗C3a復合物50%結合率所需的抗C3a血清稀釋液，取0.5mL加入50/uLPEG沉淀的上清和
50/uL125I-C3，室溫16h，用生理鹽水洗滌4次，計算Sepharose4B的放射活性（B%）。
5、標準曲線的繪制 將新鮮血清于37℃放置7d（normal
senlinaged，NSA），血清中含0.02%（W/V）NaN3。以NSA作為C3a放射免疫分析法（RIA）的標準品。NSA中C3a的濃度為
60ug/mL，可將NSA作不同濃度的稀釋，50/uL1：10000稀釋的NSA足夠抑制“I-C3”與抗C3a-Sepharose4B的結合。然后以B%為縱坐標，不同稀釋度標準品濃度為橫坐標，繪制標準曲線。本法最低檢測限為0.66nmol/L，正常值為1.55±0.87nmol
/L（X±1SD）。