• <table id="4yyaw"><kbd id="4yyaw"></kbd></table>
  • <td id="4yyaw"></td>
  • 發布時間:2019-04-21 15:58 原文鏈接: Cellandtissuelysishub

    This page should point you to the many different general and lab-specific protocols describing tissue and cell lysis and serve as forum for comparison. The ups and downs of various methods from sonication, homogenization, freeze-thaw cycles, and detergent-based lysis are examined below.

    Comparison of lysis methods

     

    Sonication

    • most efficient method of cell fractionation

    • problem: heat build up which can denature proteins (proportionate to length of sonication)

    • precaution: do on ice and sonicate intermittantly

    material: ultrasonication bath or rods

     

    Homogenisation

    • best for animal tissue; less suitable for cells

    • precaution: do on ice to reduce heat build-up and denaturation

    material: drills (polytron), pestle/tube (dounce) bead beaters

     

    Freeze-thaw

    • least effective method

    • plus: does not denature proteins as much as other methods

    material: pestle and mortar, liquid nitrogen

     

    Detergents

    • chemical method of lysis

    • problems: detergent may inhibit subsequent reactions

    • problems: detergent may disrupts protein interactions

    no additional material required, just the chemicals and typical tubes

     

    Specific protocols


    description/link   target   lysis method   type of material   
    Silver: Lysate for Westernproteindetergent (Triton)cells
    Sauer:Lysing E. coli with Lysozymes
    lysozymebacteria
    Blackburn:Yeast Colony PCRDNANaOHyeast
    Jacobs:Protocol Total Protein Isolation Using RIPA Lysis Bufferproteindetergent (RIPA buffer)cells
    Streptomyces:Protocols/Mini-Maxi PrepDNANaOHbacteria
    Western Blot/Tissue Preparationproteindetergent & physical disruptiontissue
    Eccles:Protein Lysates from Cells in Cultureproteindetergent (SDS, NP40)cells
    Eccles:Protein Lysates from Tissueproteindetergent, physical, freezingtissue
    RNA extraction using trizol/triRNAphenolcells
    Sauer:RNA Purification from E. coliRNAvarious optionsbacteria
    add another method''s nametargetlysis methodtype of starting material


    相關文章

    每年主刀800臺手術,“大師姐”抽空發頂刊刷新歷史

    文|《中國科學報》記者李思輝實習生何睿她是一位知名三甲醫院的科室主任:不僅負責科室的管理工作,而且每周4個半天坐診,每年主刀800多臺手術;她是院士師門的“大師姐”:繁忙的臨床工作之余,做研究、帶學生......

    2024年張鋒團隊迎來首篇Cell

    Fanzor(Fz)是一種廣泛存在于真核生物結構域的ωRNA引導內切酶,具有獨特的基因編輯潛力。2024年8月28日,麻省理工學院/博德研究所張鋒團隊在Cell在線發表題為“Structuralins......

    創造新的記錄!西湖大學1天2篇Cell

    葉綠體蛋白在ATP酶馬達的驅動下,通過葉綠體外膜(TOC)轉座子和葉綠體內膜(TIC)超復合體的轉座子導入。Ycf2-FtsHi復合體已被確定為葉綠體進口馬達。然而,其在前蛋白轉運過程中與TIC復合物......

    半夜靈機一動,武大教授獲得一個神奇的“工具”

    文| 《中國科學報》記者李思輝實習生畢若雪“2021年暑假的一個凌晨,我突然靈機一動,思考了很久的一個模型突然清晰起來。我立即從床上蹦起來,花了5分鐘,在紙上把它清楚地畫了出來!”說起最近發......

    Cell和Wiley開放“一稿多投”系統涉及這些期刊

    “一稿多投”一直被認為是不端的行為,但這個“規矩”是在紙質時代信息溝通不暢的情況下制定的,近年來廣大作者呼吁取消這一觀念的聲音已振聾發聵!讓人欣喜的是,截止目前,已經有兩大國際知名出版社響應了這一呼吁......

    北京理工大學,Cell+1

    2024年4月23日,北京理工大學生命學院肖振宇副教授、中國科學院動物研究所王紅梅、于樂謙、郭靖濤研究員、中國農業大學魏育蕾教授、鄭州大學第一附屬醫院何南南助理研究員在國際學術期刊Cell發表文章《3......

    Cell論文遭曝20幅圖作假,引發學術界震動

    2019年10月3日,加州大學圣地亞哥分校BrendaL.Bloodgood團隊(G.StefanoBrigidi為第一作者)在Cell在線發表題為“GenomicDecodingofNeuronal......

    研究揭示血腦屏障控制螞蟻行為的生物學機制

    美國賓夕法尼亞大學佩雷爾曼醫學院科研人員發現,螞蟻的血腦屏障在控制其行為方面起著積極的作用。血腦屏障可以調節螞蟻大腦中的激素水平,從而影響他們在蟻群中的行為。相關研究成果發表在《Cell》雜志上。研究......

    2023年張鋒團隊發表4篇Nature,Science及Cell

    RNA引導系統利用引導RNA和靶核酸序列之間的互補性來識別遺傳元件,在原核生物和真核生物的生物過程中都起著核心作用。例如,原核CRISPR-Cas系統為細菌和古細菌提供了對外來遺傳因子的適應性免疫。C......

    Cell:新研究有助于確定使我們成為人類的基因變化

    大約700萬年前,人類從我們最接近的動物親戚黑猩猩那里分離出來,在進化樹上形成了我們自己的分支。在此后的時間里---從進化的角度看是短暫的---我們的祖先進化出了使我們成為人類的性狀,包括比黑猩猩大得......

  • <table id="4yyaw"><kbd id="4yyaw"></kbd></table>
  • <td id="4yyaw"></td>
  • 调性视频