“淺析中藥與西藥的異同”這篇文章中，對比了中藥與西藥各自的優缺點，其實中藥的多靶點，協同作用好的優點是西藥的缺陷，而西藥的成份清楚機理明晰的優點是中藥的缺陷。所以，目前研究中藥，先把成份理清，機理闡明。“中藥復方如何發表高分SCI”兩篇文章，是從科研的角度，佐證現階段中藥有效成份研究的重要性。今年12月1日，復旦大學新藥益母草堿項目轉讓，1.5億元。季博在轉發這條消息時說了一句話，“至少五年內，從中醫藥中尋找有效成份開發新藥是主流。從單體回歸到復方，開發分子組方新藥，估計至少五年以后“。大家注意這里”主流“的范圍，不僅僅是中醫藥研究領域，而是整個新藥開發領域。今天分享的文章，是發表在老大雜志Cell上的文章，Artemisinins Target GABAα Receptor Signaling and Impair a Cell Identity. 2016. Cell。剛剛發表的文章。做的是青蒿素，新藥？老藥？對于化學成份藥來說，是老藥，臨床上一直在用（從中草藥中尋找新藥的好處，臨床一直在用，毒性作用可控）。對于適應癥來說，是新藥。
我們從科研的角度，來分析一下這篇文章。
先看背景，背景一般都是報道過的。
1、I型糖尿病中β細胞喪失。本文研究的細分方向是如何補充β細胞。
2、α細胞可以轉化為β細胞。
3、過表達Pax4可以將α細胞轉化為β細胞，在β細胞中Pax4可以抑制Arx。單獨抑制Arx也可以將α細胞轉化為β細胞。
4、青蒿提取物可以治療I型糖尿病。（有兩篇參考文獻。）文中提出，青蒿素治療糖尿病或者在胰島中的作用，未見報道。不知道大家想到啥了。這就是從中草藥中開發新藥的思路。從臨床上在用的中草藥中，找有效單體，開發新藥。
Figure 1. A Cell-Line Model of Transcription-Factor-Mediated Transdifferentiation for Identifying Functional ARX Inhibitors
細胞模型用的是小鼠β細胞系Min6，連cell也用細胞系來研究，胰島原代是很難搞定的。
構建了ARX誘導型的過表達穩定株。加入DOX，ARX表達，胰島素下降（α表型）。后面以胰島素為檢測指標（分子指標）。（為啥用誘導型的，估計是害怕長時間過表達，細胞不能從α返回β了。后面的篩藥是需要把α變成β。）
采用這個穩定株為細胞模型，以胰島素為檢測指標。在DOX存在的情況下（α型），進行了HCS篩選。篩選到了青蒿素。
這里HCS是篩選藥物，如果是篩選功能基因，把加藥改成基因操作工具就可以了。細胞模型和檢測指標都是一樣的。
篩選到青蒿素后，在α細胞系αTC1細胞中進行了驗證。青蒿素可以誘導αTC1細胞中胰島素的表達。其實，前面的篩選策略，可以改成在αTC1細胞中采用胰島素作為檢測指標進行篩選，更方便。那么為啥文章用了前面的復雜策略呢，肯定有原因。文中沒有明說。
到底是cell的文章，在第一幅圖里面，也討論了藥物對ARX核質定位的影響，因為ARX是個轉錄因子。
Figure 2. Artemether Induces Insulin Expression in a Cells by Targeting Gephyrin
OK，第一幅圖拿到藥了，因為是功能篩選，所以藥物功能就有了（藥效評價-細胞實驗）。下面就開始做機理了。大家注意，篩藥是在Min6細胞，機理卻是在αTC1細胞中探討的。
把藥物分子固定，進行pulldown實驗。質譜鑒定拉下來的蛋白。找到了與青蒿素可以直接結合的蛋白，gephyrin。這里找的藥物靶點，是直接靶點。其實大家看第一幅圖的描述，作者也做了加藥和不加藥的蛋白組，尋找藥物后的差異蛋白。間接靶點可以從這些差異蛋白中尋找。
接著，就進行藥靶鑒定了。采用RNAi在αTC1細胞中knockdown gephyrin，發現，加入青蒿素后不能上調胰島素的表達了。（藥物與藥靶相關性-功能相關性-回復實驗）。到底是cell，直接上回復實驗。F2D。F2E圖中，加入青蒿素，gephyrin上升（藥物與藥靶相關性-分子相關性）。