5.0 DC-CIK細胞的制備和質檢
5.1 收集步驟4和步驟3中所獲得的DC 細胞和CIK 細胞，按1:10(數目比)的比例共培養，無血清培養液中添加重組人IL-2 (300 U/ml)；
5.2 每3天半量換液一次，并補加重組人IL-2 (300U/ml)。
5.3 在第7d 收集細胞，細胞數量應達到1×1010個以上；
5.4 DC-CIK細胞的質檢：
5.4 .1臺盼藍染色檢測：活細胞應在80%以上；
5.4 .2流式細胞儀檢測細胞表面CD3、CD8、CD56等分子的表達：CD3+CD56+細胞的比例應在20%以上。
5.4 .3細胞殺傷實驗：以DC-CIK細胞為效應細胞，以腫瘤細胞(可為原代腫瘤細胞或腫瘤細胞株)為靶細胞，將效應細胞與靶細胞按10:1(數目比)的比例加入96
孔U型板中，每孔含靶細胞1 x 104個，終體積為200ml，設3個復孔。培養4h，然后取培養上清，用乳酸脫氫酶(LDH)
試劑盒檢測效應細胞對靶細胞的殺傷率。
5.4 .4收獲細胞前，取少量培養物進行細菌、真菌培養，并檢測支原體、衣原體，及內毒素(標準：病原學檢測陰性，內毒素<5 Eu)。
注：AF即Animal
Free意為無動物成分。無動物成分的重組細胞因子在生產過程中不會有任何動物源性物質，尤其是牛蛋白的混入，使得最終獲得的重組人蛋白中不含任何動物成分。這樣可避免動物病原體(如瘋牛病，克雅氏病等)的污染及外源蛋白引起的機體異種排斥和過敏反應，因此細胞治療的體外細胞培養過程中最好使用無動物成分的重組細胞因子。
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