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  • 發布時間:2019-03-30 17:29 原文鏈接: DNA偶聯于溴化氰活化的瓊脂糖上

    試劑、試劑盒

    鹽酸用前新鮮配制溴化氰活化 Sepharose 4B (Pharmacia Biotech)

    實驗步驟


    1) 制備標記的被連接的寡核苷酸探針


    2) 稱出3 g溴化氰活化的Sepharose 4B (1 g凍干樹脂可得到終體積約3. 5 mL的凝膠體積)。


    3) 將干樹脂置于一個15 mL的錐形聚丙烯管中。用10 mL lmmol/L鹽酸水化樹脂,彈擊及來回顛倒管子以輕輕混勻。1 min后,將漿狀樹脂移入一個60 mL粗燒結玻璃漏斗中,緩緩倒入500 mL 1 mmol/L鹽酸流過漏斗以洗滌和溶脹樹脂(這個過程將花費約 15 min)。


    4) 用100 mL水洗滌樹脂,然后用100 mL 10 mmol/L, pH 8.0的磷酸鉀洗滌。


    5) 將寡核苷酸偶聯于溴化氰活化Sepharose 4B上

    展開


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