一、試劑盒組成、貯存、穩定性 1. 說明書,耗材:96孔DNA制備板,96孔1.6 ml深孔板,96孔V型底板。 2. Buffer PCR-A:DNA結合溶液。室溫密閉貯存。若出現沉淀,應于65℃溫浴溶解并冷卻至室溫后再使用。 3. Buffer W2 concentrate:去鹽液。使用前,根據瓶上指定的體積加入乙醇,混合均勻,室溫密閉貯存。可用100%乙醇或95%無水乙醇。 4. Eluent:2.5 mM Tris-HCl,pH 8.5。室溫密閉貯存。 二、操作步驟 用戶可以選擇負壓法或離心法。 A. 負壓法 1A. 正確連接負壓裝置,將96孔DNA制備板置于負壓裝置上;在PCR、酶切、酶標或測序反應液中,加3個體積的Buffer PCR-A(若Buffer PCR-A不足100 ul,加至100 ul);混合均勻后轉移到96孔DNA制備板中,開啟并調節負壓至-25-30英寸汞柱,緩慢吸掉板中溶液。 2A. 加0.3 ml Buffer W2,吸盡管中溶液。以同樣的方法再用0.3 ml Buffer W2洗滌兩次。 * 確認在Buffer W2 concentrate中已按試劑瓶上的指定體積加入無水乙醇。 3A. 保持負壓將96孔DNA制備板抽吸10 min。 4A. 導流管朝下將96孔DNA制備板于長纖維性紙巾上用力拍擊6次。 5A. 將96孔DNA制備板置于96孔V型底板上,在膜正中央加25-30 ul 水或Eluent,室溫靜置1 min。3 000xg離心5 min洗脫DNA。 B. 離心法 1B. 在PCR、酶切、酶標或測序反應液中,加3個體積的Buffer PCR-A(若Buffer PCR-A不足100 ul,加至100 ul);混勻后,轉移到96孔DNA制備板中,將96孔DNA制備板置于96孔1.6 ml深孔板中,1 000xg離心1 min,棄濾液。 2B. 在96孔DNA制備板中,加0.3 ml Buffer W2,1 000xg離心1 min,棄濾液。以同樣的方法再用0.3 ml Buffer W2洗滌一次。 * 確認在Buffer W2 concentrate中已按試劑瓶上的指定體積加入無水乙醇。 3B. 將96孔DNA制備板置于96孔1.6ml深孔板中,3 000xg離心10 min。 4B. 將96孔DNA制備板置于潔凈的96孔V型底板中,在膜正中央加25-30 ul水或Eluent,室溫靜置1 min。3 000xg離心5 min洗脫DNA。 收起 |