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  • 發布時間:2019-03-25 16:25 原文鏈接: DNA的酶切與連接——DNA片段連接

    實驗方法原理核酸片段可以通過連接酶的作用連接起來而獲得重組分子。
    實驗材料

    λDNA EcoT14I:由11條DNA片段組成

    試劑、試劑盒

    T4 DNA連接酶及其配套的10×連接緩沖液 0.5×TBE電泳緩沖液 6×Loading Buffer Goldview 瓊脂糖

    儀器、耗材

    電泳儀 水浴鍋 移液器 微波爐 成像設備

    實驗步驟

    1.取200ul離心管按下表加入試劑。

    2.混勻后點動離心,將溶液甩至管底。
    3.置于已調好溫度為12℃-14℃水浴鍋(或PCR儀)中。
    4.保溫2h后取出。
    5.電泳檢測。

    λ/EcoT14 I 樣品 10ul(兼作 DNA Marker)+ 10X的loading buffer

    DNA連接樣品:10 ul + 10X的loading buffer 2 ul
    6.DNA連接片段的電泳預期結果。


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