DNA污染的洗脫后去除實驗

試劑、試劑盒 EDTADNA 酶ⅠDNA 酶Ⅰ緩沖液RNA 樣品

儀器、耗材 水浴鍋

實驗步驟

一、材料

1. 緩沖液、溶液和試劑

用焦碳酸二乙酯（DEPC) 處理過的水

EDTA,25 mmol/L

2. 酶和酶緩沖液

DNA 酶Ⅰ, 擴增級（無 RNA 酶）

DNA 酶Ⅰ緩沖液，10X

3. 核酸和寡核苷酸

RNA 樣品

4. 特殊設備

水浴，預設為 65°C

二、方法

①向一無 RNA 酶的管中加下列成分。

RNA                                                 不多于 80ug

DNA 酶 I 緩沖液，10X                     1ul

DNA 酶 I(lU/ul)                                 1ul

用 DEPC 處理過的水將總體積調到 10ul。

②室溫下溫育 15 min。

③加 1ul25 mmol/L 的 EDTA 溶液，并于 65°C 加熱 10min 以滅活 DNA 酶 I。

用這種方式處理的樣品適合直接用于 RT-RCR。