1.3 室內質量控制程序
臨床檢驗的檢測結果，每次或每天之間不可能沒有誤差。決定允許的誤差范圍，以臨
床上不造成誤診與漏診為準，通過以下步驟來確定質控范圍。
1） 最佳條件下的測定誤差。
2） 已知值的血清在常規檢驗條件下的誤差。
3） 未知值的血清在常規檢驗條件下的誤差。
4） 臨床應用的要求。對任何一個試驗都應確定一個允許的誤差范圍，前題是滿足臨床要
求。如允許誤差定得過小，在臨床上不存在任何意義，但為了符合該規定卻要花費很大人
力、物力和時間。相反，如果將允許誤差定得過大，將使監測系統察覺不到臨床上要求檢
出的誤差，失去質控的意義。
1.3.1 最佳條件下已知值質控血清變異（optimal conditions variance,簡稱OCV）的測定
在本實驗室最佳條件下（包括操作者、試劑、儀器等）檢測質控血清20-30次，測得
結果計算，求出該組數據的均值和標準差（SD）表示該實驗室的最佳工作質量。
現舉例說明HBsAg ELISA法檢測時OCV的測定。使用的質控制血清為臨界血清，
HBsAg濃度為5ng/ml。在該實驗室中選擇素質最好、操作最熟練的技術員進行認真地專門
測定，選用最佳的試劑盒，檢測之前，將恒箱、加樣器等認真校正、調校正、調試，使用
新的加樣吸頭等，即在最佳、最理想的條件下進行檢測。除質控血清外同時測定陰性對照
品和陽性對照品。并作雙份測定，得出2個吸光值（A值），求出X。連續作20次，求出20
個X，即X1……X20。從這20個數據中，求出OCV的X和SD。
1.3.2常規條件下已知值質控血清變異（routine conditions variance-known value,簡稱
RCVK）的測定。
做常規檢驗的技術人員，在常規檢驗的條件下，將質控血清放在常規檢測樣本中，進
行20次檢驗，結果計算同OCV法。一般認為RCV的SD在OCV的SD兩倍范圍內可以接受。
若太大應該查找原因，使其向OCV的SD值靠近。在改進實驗室條件后（例如較正加樣
器，糾正洗板操作，調正溫育溫度等），重新進行RCVK的測定。如果RCVK的SD值更
小，說明OCV不是最佳條件下測定的，應重新再測OCV。常規條件下，RCVK肯定要比
OCV大。通過質控控制各項條件，使RCVK的數據盡可能接近OCV值。RCVK的數據反映
該實驗室日常工作的質量，用于作質控圖，對室內檢驗的結果進行控制，每日檢驗的結
果，報告能否發出。
1.3.3常規條件下,未知值質控血清變異(routine conditions variancl-unknown value 簡稱
RCVU)的測定
有時為了避免主觀性,再作RCVU測定。
測定步驟同RCVK，但檢測的操作者不知質控血清的定值，或在操作者不知哪份是質
控血汪清的條件下進行常規檢驗，以排除操作者的主觀性。在此不再舉例說明。
1.3.4質控圖
通過以上三步驟，可以開始作室內質控圖，根據RCVK的和SD作質控框圖。利用質控
圖可以對每次檢驗的結果進行監測，當沒有更換另一批號試劑盒和另一批號質控血清時，
該質控圖可以連續作下去。
質控血清的S/CO值低于-2SD的范圍,屬"告警"，應尋找原因并在質控圖上記錄查出的
原因。
ELISA試驗中，各種檢驗項目的誤差允許范圍均有待在實踐中得出結論，以上只是舉
例說明質控方法，不是定論。2SD是一般公認的允許誤差限度。每批測定放一份質控血清
時，一次超過2SD應作為"告警"，二次超出2SD為"失控"。當質控過程中，出現失控時，出
現失控時，應查找原因，通常是試劑盒或質控血清失效造成。更換試劑盒或更換質控血
清，找出原因糾正后重新檢驗。如果檢驗結果仍達不到要求或找不到原 因時，應重復進
行OCV的檢驗。如果OCV檢驗的結果仍是好的，說明常規操作出現問題。
一般認為：①一次超出3SD；②連續二次超出2SD；③3-5次連續處于一側的2SD之內；
④5～7次連續偏向橫軸的一側，均為失控。
第③、④種情況，單獨依靠記錄往往是不易察覺的，但在質控圖上可以清晰地發現這種失
控。
1.3.5統計學計算方法--"即刻性"質控
以上介紹的質控方法基本上與臨床化學測定的質控方法相同，但ELISA有其特殊性，
最合適的質控方法尚待研究建立。有些實驗室不是每天進行ELISA項目的檢驗，而ELSIA
試劑盒效期短，用一批號試劑盒連續常規測20次，難度較大。采用"即刻法"質控統計方
法，只需連續測3次，即可對第3次檢驗結果進行質控。
"即刻法"的建立具體計算方法如下：
1)先將測定值從小到大排列
2)計算X和SD。
3)計算SDI上限和SDI下限值。
4)將SDI上限、SDI下限值與SDI值中的數字比較。當SDI上限值和SDI下限值＜n2SD時，表
示處于控制范圍內，可以繼續往下測定，繼續重復以上各項計算；當SDI上限和SDI下限
有 一值處于n2SD和n2SD值之間時，說明該值在2SD~3SD范圍，處于"告警"狀態；當
SDI上限和SDI下限有一值＞n2SD時，說明該值已在3SD范圍之外，屬"失控"。數值處
于"告警"和"失控"狀態應舍去，重新測定該項質控血清和病人樣本。舍去的只是失控
的這次數值，其他次測定值仍可繼續使用。
即刻性質控統計方法，適于ELISA測定的質控。
當檢測的數值超過20次以后，不必再使用"即刻法"質控統計計算，可以轉入常規的質
控圖的質控。將前20次的數值求出的和SD作質控框架圖，第21次的數值，依次點入即
可。
1.4室間質量評價（external quality assessment,簡稱EQA）
室間質量評價簡稱室間質評，是由質控中心采用一系列的辦法連續地、客觀地評價各
實驗室的試驗結果，并發現室內質控不易發現的不準確性，了解各實驗室之間結果的差
異，并幫助校正，使具有可比性。各實驗室試驗結果報到質控中心，經過統計分析，得出
相互比較的結果。這種評價不能控制各實驗室每天發出的檢驗報告，而是一種回顧性評
價。室內質控主要監測試驗結果的精密度，而室間質評主要控制試驗結果的準確度，不能
互相替代。參與質評的實驗室應先做好室內質控。
1.4.1室間質評的方法
1、 發質控物進行調查
這是國內外室間質評的常用形式。部臨檢中心對乙肝標志物ELISA檢驗的室間質評采
用定期發放質控物至各實驗室，各實驗室在規定的日期進行檢驗，并將檢驗結果報至部臨
檢中心。部臨檢中心經統計分析，將評價結果寄回各實驗室。通過評價，各實驗室了解本
室工作質量，發現差距，并設法改進，以不斷提高檢驗質量。
這種評價方式有一定缺點，即各實驗室常對質控物特殊對待，在檢驗時選用特殊試劑
盒，選派特別的技術員進行檢驗，有的實驗室互相和對結果并作修改。這就使EQA的結果
不能反映該實驗室日常工作水平。
2、 派觀察員到實驗室進行試劑調查
這種調查事先不通知，臨時派觀察員到實驗室，指定采用常規方法，檢驗規定的一組
標本，進行評價。
這種調查方式，容易發現該實驗室存在的實際問題，可以直接給予指導和幫助，解決
問題，提高檢驗質量。這種調查通常可以使用真實樣本，避免采用質控物的一些缺點。