做ELISA實驗，有幾種常見的實驗方法，他們分別是競爭法、捕獲法、間接法、夾心法、而夾心法又可以分為雙抗體夾心法和雙抗原夾心法！在今天的文章中，將詳細得跟大家講述競爭法的實驗原理！
競爭法一般分為直接競爭法和間接競爭法，這里我們以直接競爭法為例進行原理講解。直接競爭法，其基本原理是：將合適濃度的包被抗體包被于微孔板中，加入無關蛋白載體封閉未結合位點，加入標準品（樣本）和生物素標記的抗原物質進行競爭結合，經合適的溫度和一定時間的孵育，洗滌后，加入HRP標記的鏈霉親和素進行反應，TMB顯色，微孔板中顏色的深淺與待測物的濃度呈負相關。
該方法一般用來檢測具有較少表位的小分子物質，當然，這種方法也可以用來檢測大分子抗原物質甚至是抗體。檢測大分子抗原物質時，由于空間位阻的影響，使得該檢測方法沒有雙抗體夾心法檢測大分子抗原物質靈敏度高。這種方法在檢測抗體時，可能由于兩種競爭的抗體來源不一，導致兩種抗體趨同性不高，就使得檢測結果的可靠性不高。