ELISA測定試劑盒手工操作

ELISA測定試劑盒操作技術的影響：

1）應保證清潔，整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸，以上的措施可以使“花板”降至低限度，從而提高檢測的特異性，并得到更準確。

2）合理安排檢測量，ELISA試劑盒以免反應板過多造成洗板等待時間長。

3）加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。

4）用洗板機洗板時，保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干，防止針口有纖維蛋白或異物，這些異物在洗板的過程中易產生拖帶現象而導致“花板”的出現。

5）嚴重溶血：以HRP為標記的ELISA試劑盒測定中，殘留在孔內的血紅蛋白具有過氧化物酶樣活性，催化底物顯色造成假陽性。

減少ELISA測定試劑盒誤差的方法

1. 做實驗時少說話，防止唾液掉進酶標條中。

2.加入一抗二抗需要放入37°。

3.如果同時做多個板子，多個板子別羅一起；盡量少用排槍。

4.加樣時，由低濃度向高濃度加，這樣減少跳孔的幾率。

5.勤換槍頭。

一、移液器的使用，加樣（抗體）等需要準確定量的試劑時不使用排槍，經驗證明排槍很不準確，極易跳孔，不要圖便宜買低檔的tips 因為ELISA不但會放大被檢測的目的蛋白，也會放大非特異結合的雜質蛋白。

二、倍比稀釋樣品時，稀釋倍數要小于10。

三、所有的裝跟ELISA測定試劑盒相關試劑的容器，玻璃制品的要干烤過或者使用一次性的樹脂容器。