ELISA試劑盒實驗步驟詳解

做任何實驗，都不行能完全沒有差錯，我們能做的就是盡最大的努力削減實驗差錯。在ELISA試劑盒實驗操作中，差錯分有系統差錯、偶然差錯、過錯差錯，而一個小小的差錯主意可以影響到實驗，那么怎樣才干縮小實驗差錯呢？除了需求仔細之外，還有一些需求要點留意的當地。

1：留意試劑盒保存期，過保存期的試劑不能運用。

2：評價試劑的實用性，試劑的穩定與否，對率的高低到頭重要。在試劑啟用前，應進行陰、陽對照及樣品重復對比實驗，斷定試劑符合要求后方可運用。

3：嚴厲把握顯色時刻，顯色時刻過短，參加停止液反應停止后，底物結合物的量過少，易呈現假陰性。超過顯色要求時刻后顯色，應判為假陽性，這可能與試劑本身有關。加顯色劑后當即顯色，不行報陽性，這可能是本底顯色的成果。

4：加樣要、快速。如果加樣不，酶生成物的量不能斷定，直接影響顯色成果。顯色的深淺及A值的測定與參加顯色劑和停止液的量有關，所以加樣應穩重。要求在必定時刻內加樣結束的實驗，如果加樣緩慢，便呈現差錯，并且試劑長時刻暴露在外，特別室溫過高時，保存期會縮短乃至失效。

5：檢驗技師應具有從事實驗室操作的基本素質和實踐經驗。能嫻熟操作實驗儀器、器械，具有必定總結和剖析問題的才干，對實驗中呈現的意外情況能及時妥善解決。

6：運用校對過的微量移液器，掃除自然差錯。移液器與否對定量檢測尤為重要。

7：仔細閱讀說明書，嚴厲依照說明書要求進行規范化操作。不同批號的試劑不行混用。值得改善的當地，重復實驗斷定建立后才干改善。

8：洗刷完全，如若洗板不完全，酶結合物本底顯色會呈現假陽性。洗刷液要新鮮，現用現配，陳腐的洗刷液會呈現本底增高現象，也可能呈現假陽性。

9：嚴控反應時刻，反應時刻過長，酶失活；反應時刻過短，酶結合物不能與血清中的微生物抗原抗體充沛結合，生成物結構松懈不結實，容易洗掉，都可能造成假陰性。