小鼠白蛋白(ALB)酶聯免疫分析
本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍:
96T
20μg/L -500μg/L
使用目的:
本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關液體樣本中白蛋白(ALB)含量。
實驗原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠白蛋白 (ALB)水平。用純化的小鼠白蛋白(ALB)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白蛋白 (ALB),再與HRP標記的白蛋白(ALB)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在 HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白蛋白(ALB)呈正相關。用酶標儀在 450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠白蛋白(ALB)濃度。
試劑盒組成:
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟:
標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘。配液:將 30倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30倍稀釋后備用洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30秒后棄去,如此重復 5次,拍干。加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。溫育:操作同 3。洗滌:操作同 5。顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘。
2.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
3.測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。測定應在加終止液后 15分以內進行。