| 實驗方法原理 | 離子阱質譜儀是一種電聯質譜儀，在分析前先將離子聚集儲存。離子阱是儀器的核心部分，既可以作為質量分析器，又可以作為碰撞室。 四極離子阱使用射頻方式在的四極桿引導離子從離子源進入離子阱。離子阱由兩種電極構成，一個環形電極，兩個端蓋 (end-cap) 電極（圖 5.2,), 離子進出離子阱都經過端蓋電極上的小孔令環形電極上施加的高射頻 (RF) 電壓將成子捕獲在其產生的可場中，此射頻電壓的大小決定了被捕獲離子的肺率及運動。大于某一特定m/z值的離子貿在離子阱中，被殘留氨氣碰撞冷卻，使離子的正弦震蕩坍縮，在很短時間內，運動軌道由大變小 通過線性變化RF 電壓，同時對端蓋電極施以一小電壓，使連續質荷比的離子共振發射，得到完整的質譜圖。共振發射是指在離子阱中變得不穩定的離子被發射到端蓋電極的同軸方向，穿過端蓋電極并被電子倍增檢測器的轉換電極檢測，轉換電極采用離軸 (off-axia) 位置，是為了除去中性物質的背景。 
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| 實驗步驟 | 通過離子捕獲和離子選擇發射的過程，具特定質荷比的離子可以從離子阱中分離出來。如果這一離子在離子阱中裂解，而且碎片離子也被共振發射，就得到了 MS/MS 串聯質譜圖。如果碎片離子中除某一特定質荷比的離子外，其他所有碎片離子均被共振發射，這碎片離子可以重復進行裂解／共振發射過程，這樣就得到（多級串聯質諸(MSn), 曾有文獻報告做到 MS12, 而 MS3 巳成為常規實驗，特別是在糖肽的結構分析中,在離子阱中對某一特定m/z比值離子的分離和裂解包括：共振發射所有質荷比大于和小于這一比值的所有離子，這樣在離子阱中只剩下選定m/z比值的離子（被分離鈉離子），這時改變電極電壓使離子能低增加，這樣離子就會與殘留的中性氣體 (He) 碰撞而裂解，產生的碎片離子用上文所述的掃描方式測定。被捕獲離子上所加的能量大小可通過改變參數而調節，在某些儀器中這一參數袚稱為相對碰撞能量 (relative collision energy, RCE)。如上文 PSD-MALDI-MS 所述，單電荷離子的裂解比雙電荷離子裂解需要更多的能量。某些離子阱實驗中， RCE 可以手動調節產生非賞好的效果., 離子阱質譜儀的其他一些可以改變并影響儀器性能的參數包括在任何一次捕獲中允許進入離干阱的離子數目，以及這種捕獲超過多少次后信號將被平均以增加信噪比。如果有太多m/z比值非常接近的離子被捕獲，會觀察到被稱為空間電荷效應 (space charging) 的現象。由于m/z比值非常接近的離子之間運動軌道相互影響，所以空間電荷效應降低了實驗測量質量的精確度。因此在設置參數時必須注意不會對數據起負面影響, 商業化的離子阱質譜儀的儀器控制軟件支持數據依賴裂解功能，因此非常適用LC-MS/MS 分析。 展開 |
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