YFP和GFP其實是序列基本相同的兩種蛋白,YFP就是把Thr203以Tyr取代,GFP則不發出綠色熒光,而發出較長波長的黃色熒光,也就是YFP。因此兩者最大的區別則是發射波長了。
我覺得這兩種蛋白標記應該都沒有問題,只是有幾個問題應該考慮:
1. 應該標記在C端,一般的核定位序列均位于蛋白N端,如果將GFP或者YFP標記在N端很可能影響核定位;
2. 取決于你的核探針,如果是紅色的探針,選用GFP比較經典,兩者疊合的橙色也是很多文獻上常采用的。但如果是藍色的探針,則選用黃色比較容易區分一點,比較好看,不過做這個的好像也不太多。
最后還有一點就是GFP的質粒比較多,很多還有EGFP序列,比如我們實驗室的EGFP熒光就非常好看,所以我還是建議你選經典的GFP\EGFP。祝實驗順利。