GPC高效凈化食品中的油脂

圖1.  標準樣品色譜圖。

食品中塑化劑的檢測過程中，由于很多食品中含有大量油脂，干擾了塑化劑的測定，還會對檢測儀器造成損害。本文使用GPC Cleanup系列凝膠凈化系統進行樣品處理，可有效去除樣品中的大分子基質、小分子干擾物質，從而提高后續分析的靈敏度與準確性，延長分析儀器的使用壽命。

近期中國臺灣爆出多種食品含有有毒塑化劑的案件，臺檢測機構在飲料、食品中檢測出塑化劑（鄰苯二甲酸酯類）。由于很多食品中含有大量油脂，在檢測中嚴重干擾塑化劑的測定，而且對檢測儀器造成損害。而樣品的前處理過程對目標化合物最終的分析結果起到非常重要的作用，依據《GB-T 21911-2008 食品中鄰苯二甲酸酯的測定》，前處理中使用GPC凈化可以解決上述問題。本文采用GPC Cleanup 系列凝膠凈化系統進行樣品的凈化處理，可有效去除樣品中的大分子基質、小分子干擾物質，收集目標餾分，從而提高后續分析的靈敏度與準確性，延長分析儀器的使用壽命。

圖2.  樣品與標準品色譜圖疊加。

儀器開發與應用

LabTech 公司應市場需求推出GPC Cleanup 800 凝膠凈化解決方案。使用該系統只需將萃取好的樣品加入到全自動液體處理器的瓶中，便可以自動完成樣品GPC凝膠凈化過程，最終目標物被收集到收集瓶中，直接濃縮后進行后續分析。該套系統的使用可以極大簡化樣品前處理的繁瑣步驟，減少人為因素對實驗結果的影響，有利于保證樣品的平行性和準確性，同時整套系統完全密閉，具有溶劑回收功能，是一套綠色環保型樣品前處理系統。

試劑與儀器

凝膠凈化系統（GPC800，北京萊伯泰科儀器有限公司）；氣質聯用儀；乙酸乙酯、環己烷、正己烷（農殘級）；鄰苯二甲酸酯類標準品。

圖3.  凈化前的樣品。

實驗操作

1、 配制100ppm鄰苯二甲酸甲酯和鄰苯二甲酸癸酯混標溶液取樣品0.5g于5ml容量瓶，用乙酸乙酯:環己烷 1:1（V/V）定容至刻度，渦旋混勻，轉入 GPC 進樣瓶。

2、編輯方法和批表，將標液進到 GPC 儀器中，觀察出峰時間。

3、根據標樣出峰譜圖確定樣品方法中的收集時間，編輯批表批次運行。

4、將凈化后的餾分濃縮至近干用正己烷定容至2ml。

5、將處理好的樣品進到GC-MS檢測。

圖4.  凈化后的樣品。

結果與討論

GPC方法的確定

樣品中需測量目標分析物為鄰苯二甲酸酯類物質，選擇分子量最大和最小的鄰苯二甲酸癸酯和鄰苯二甲酸甲酯兩種標準物質，根據GPC分離原理分子量相對較大的先出峰，分子量相對較小的后出峰，故 17 種目標分析物出峰時間都在兩峰之間，根據譜圖確定餾分收集時間為 8~18.5min（如圖2）。分析樣品為辣椒精油（編號為 466）和辣椒醬（編號為 065）。

凈化效果

圖2粉色曲線為辣椒精油的色譜圖，藍色曲線為標準物質色譜圖，白色曲線為辣椒醬色譜圖。圖中對比粉色和藍色曲線可看出大分子油脂類大部分在３~８min出峰，而目標物在 8min 以后出峰，故 GPC 能除去大部分油脂類物質。從圖中對比白色和藍色曲線可看出辣椒醬中一些色素類與大分子的鄰苯二甲酸酯類物質分子量接近，可與 14min 以后的小分子鄰苯二甲酸酯類物質良好分離。從凈化前后樣品與收集液實物圖可明顯看出，GPC 凈化效果比較滿意。

圖5.  樣品的GC-MS譜圖及數據。

實驗數據

由于塑化制品隨處可見，稍有不慎就會引入鄰苯二甲酸酯類物質，包括溶劑中自帶的鄰苯二甲酸酯類物質。所以針對不同批次的試劑做了一些本底實驗，結果發現即使是農殘級的試劑也會含有一定量的鄰苯二甲酸酯類物質，如 DBP、DIBP、DEHP含量稍高在 20~40ppb左右。且不同批次最大濃度目標物各不相同。

結語

GPC 凝膠凈化依靠分子尺寸排阻大分子油脂類物質的效果很理想。非常適合凈化油類樣品中的大分子油脂類物質。萊伯泰科自動凝膠凈化裝置包括了自動上樣、凈化和自動收集功能，能夠實現無人值守并且明顯節省樣品處理時間。