如今，樣品混合檢測在樣品混合的總數量、拆分樣品的數量和核酸擴增試驗的使用類型方面都已有所不同。目前用于混合樣品檢測的NAAT試驗的性能對比數據還很有限，但是看起來具有低檢出限值的試驗表現的更為良好。接下來要做的研究是對用于混合樣品檢測的不同NAAT試驗的性能比較進行評估分析。
雖然NAAT檢測很有前景，但在常規檢測地點采用什么樣的方法才是檢測HIV的最佳途徑還需進一步明確。到目前為止，NAAT已被列入高危人群的篩查方法中。但是在HIV低危區域，NAAT的性價比、陰陽性預測值等還是未知數。在一定的區域，第三代或第四代EIA產品可能成為NAAT的替代品。雖然在明確急性HIV感染者的數量上第三或第四代EIA產品低于NAAT，但它們還是可以用來確定一些急性感染者的。舉例來說，2003年在西雅圖，通過采用NAAT方法，用于急性HIV感染的HIV-RNA篩查試驗診斷出7例急性HIV感染。其中四份樣品進行了復檢，這四份樣品中的兩份通過第三代EIA試劑檢測后為陽性。一項在馬拉維進行的前瞻性研究發現，在NAAT確定的HIV病例中，大約有90%都能通過快速檢測試劑和p24抗原檢測試劑測出。由此看來在低收入地區，第三和第四代EIA產品很有希望作為急性HIV感染檢測的替代方法。當然在這些地區，可行的話還是推薦先做一個標準的EIA檢測，然后進行混合樣品NAAT篩查。
快速HIV抗體檢測
標準EIA檢測的一個缺點在于病人大約需要兩個星期才能得到結果，許多在公立檢測機構進行測試的病人并不會回去拿他們的檢測報告。缺乏對檢測結果的隨訪是一個嚴重的問題，這一問題在那些測試為陽性或是可能已經接觸了HIV的人群中的發生率最高。而快速HIV檢測試劑由于其檢測過程只需要不到30分鐘的時間，因而檢測結果在當天即可獲得；同時快速檢測可在診所或非常規檢測場所諸如急診室、社區中心等場所進行，因而使用非常方便。總的來說，快速檢測與傳統的EIA相比較更受病人的歡迎，并且也更容易拿到他們的檢測結果——尤其是在一些非常規場合，如公共浴室等處。
目前已有四種HIV-1/2快速診斷試劑通過了FDA認證，其中一種是可以用于唾液樣品檢測的OraQuick
Advance Rapid
HIV-1/2抗體檢測試劑（見圖1）。這些試劑的靈敏度也已與標準第二代EIA產品做過比較。每種快速檢測試劑都在其膜上都包被有合成抗原（HIV-1的gp41和HIV-2的gp36），檢測時可將樣品（末梢血、靜脈血或唾液）加在膜上。如果樣品中含有抗gp41的抗體，那么膜就會改變顏色。另外，每種檢測試劑都采用羊抗人IgG抗體作為質控，每種試劑也都需要定期采用外部質控品進行檢查。
圖1. 已獲FDA批準的快速HIV檢測試劑
每種快速檢測試劑依照臨床實驗室改進修正案（CLIA‘98）的要求規定了操作人員和檢測機構的類型。沒有受過正規實驗室培訓和在傳統實驗室以外進行操作的人可使用獲得批準的試劑，這類檢測試劑必須能夠直接采用未經處理的樣品（如唾液或全血），并且能夠易于讓那些未經過正規實驗室訓練的人操作。目前快速檢測試劑是唯一可以在實驗室外進行操作的HIV檢測試劑。
快速檢測試劑的另一個優勢在于它的非侵入性，比如2004年FDA批準的唾液HIV快速檢測試劑。采用全血或唾液樣品檢測HIV1/2
抗體的OraQuick Advance Rapid
HIV1/2試劑的后期市場調查顯示出良好的結果。對超過135,000全血樣品和超過26,000唾液樣品進行的檢測結果表明，全血樣品的特異性為99.98%，陽性預測值為99.24%；唾液樣品的特異性為99.89%，陽性預測值為90%。雖然唾液樣品的特異性稍遜于全血樣品，但專家們并不想勸阻人們不要使用，這是因為該產品在非侵入性上的優勢足以彌補其在特異性上的略微不足。
雖然有關快速HIV檢測試劑的數據令人鼓舞，但在使用時仍有一些地方值得我們小心。Steckler等人報告了三起OraQuick
Rapid HIV-1/2抗體檢測試劑漏檢的早期HIV感染者，這三例病人均由隨后進行的第三代EIA試劑和免疫印跡（Western
Blots）所證實為HIV抗體陽性。雖然這些案例可能是由于操作者的失誤所引起，但這些發現提示在高危人群中進行RNA樣品混合測試是很有意義的。假陰性結果的報告也同時強調了對于陰性結果進行正確判斷的重要性。
有待商榷和發展：尿液測試
尿液HIV檢測能夠檢測出尿液樣品中完整的HIV
IgG抗體，并且該類產品已經通過FDA批準可以與EIA與Western
Blot一起使用。由于尿液檢測試劑的方便性和無侵入性，加之尿液可以在室溫下較長期地貯存，因而采用尿液作為樣品進行檢測有助于HIV檢測的進一步推廣。盡管尿液HIV檢測擁有那么多優勢，其表現也與血液檢測產品相差無幾（一項研究顯示尿液HIV檢測的靈敏度達到98.7%），但目前基于尿液的HIV檢測試劑卻并不常用。
快速尿液HIV檢測試劑雖然已經商品化，但尚未得到FDA的批準。Aware-Urine試劑（Calypte
Biomedical公司產品）最初檢測結果顯示很有前途，但最近在烏干達鄉村進行的研究發現其靈敏度較低。該研究表明，與采用WB確認的血清樣品進行檢測的EIA相比，942份尿液樣品的靈敏度和特異性分別為88.7%和99.9%。
家用HIV測試
家用快速HIV檢測試劑對于提高HIV檢測的使用量具有潛在的好處，但其在公共衛生等專業機構中能起到什么作用現在還不清楚。家用檢測試劑的好處在于能夠有效的保護隱私以及操作方便——比如不用去公立HIV檢測機構或醫療機構進行檢測。迄今FDA還沒有批準任何一種完整的HIV家用檢測試劑盒；然而在1999年，FDA批準了第一個HIV家用樣品收集品——Home
Access HIV-1 Test
System。使用該收集器可以使人們通過郵寄的方式將在家采集的末梢血樣品寄給專業檢測機構，三天以后可以通過電話查詢結果。
2006年，FDA對一種完整的快速HIV家用檢測試劑——OraQuick ADVANCE 1/2進行了復審。該試劑可以用末梢血或唾液作為樣品進行測試。當樣品被加入測試裝置后，將裝置放入試劑管。測試結果可在20-40分鐘內得到。
雖然家用檢測試劑的優勢是那么的引人注目，但是仍然存在著許多顯著的問題。目前最關注的問題在于價格；舉例來說，實驗室需要為每個OraQuick試劑支付12-17美元，而在零售藥房，價格可能會更高。過高的價格可能會使該類產品在高危人群中的普及使用成為一個問題，也可能阻止大眾對其的接受程度。另外，在一些公立HIV檢測機構，OraQuick快速檢測試劑無法解釋的高假陽性率也使得人們高度關注其可能會在家用測試中引發的潛在的假陽性結果。另外一些有關家用HIV檢測試劑的問題還包括：1）家用HIV檢測試劑是否能擴展檢測的途徑？2）客戶能否正確的使用它？3）家用HIV檢測的使用者由于無法得到與醫務人員面談的機會，是否會引發潛在的危害？4）如何保證家用樣品收集器不影響公共衛生機構的操作？正是由于還存在著許多未知數，所以FDA要求OraQuick的制造商能證明其裝置能被外行人正確操作。目前，Ⅱ期審查正在進行中。
HIV確認試驗
所有的HIV陽性篩查結果都必須由確認試驗進行確認。確認試驗包括WB、間接熒光免疫抗體測試（IFA）和新近推出的已被FDA批準的核酸擴增試驗——APTIMAHIV
1 RNA
Qualitative試劑。確認試驗與篩查檢測相比具有高度的特異性，但也更為耗時以及價格較高。IFA由于其價格昂貴且對操作人員的技術要求較高而很少被使用。WB是傳統的確認試驗，基于識別主要的HIV蛋白（p24、gp41和gp120/160）；改良后的WB可以確定并區別HIV-1和HIV-2型感染。WB試驗原理為單個HIV蛋白由于分子量的不同可通過電泳分離，然后被轉移至硝酸纖維膜上。將病人的血清加于膜上，如果存在抗體，它們就會與對應的抗原相結合。CDC指南是這樣定義一個WB陽性結果的，即至少與主要抗原中的兩個反應；而陰性結果是所有條帶皆不出。如果反應結果介于陽性與陰性標準之間，則視為不確定結果。
在EIA陽性檢測結果中大約會有10%—20%的不確定結果，而臨床上應考慮的是這類結果的危險因素和病人的醫療狀況。某些不確定結果很可能是真的感染者，比如與p24、p31和p55有反應，但p17卻似乎是真的陰性結果。不確定結果可以是由高水平的非特異性及有交叉反應的抗體所引起的非特異性反應。在使用確認試驗時，假陽性結果很少會出現，當然也不能完全排除存在的可能。假陽性結果可能會出現在伴有自身免疫性疾病的病人身上。對于不確定結果進行復檢的時間一般是在2周到6個月的范圍內。
結論
自HIV肆虐25年以來，在病原學、免疫學以及HIV感染的治療上都取得了長足的進展。與這些進展同時發展的是不同的HIV檢測技術。自第一個HIV檢測試劑問世以來，新的技術的不斷發展增加了測試的靈敏度和特異性——縮短窗口期——使HIV感染能夠更早地被檢測出——通過更快速和無侵入性的檢測使測試變得更為方便。未來在快速尿液檢測和采用唾液以及末梢血進行的快速RNA檢測方面還有很大的改進空間。HIV檢測、公共衛生和臨床治療是緊密相連的；現在所面臨的最大挑戰就是如何將這三者全面的聯系起來，從而使得對HIV的控制和治療取得更大的進展。
參考文獻（略）
作者簡介：Carina Marquez，美國舊金山加州大學醫學院博士生；Nicola M.Zetola,MD，加州大學醫學院感染科醫生；Jeffrey D.Klausner,MD,MPH,加州大學醫學院助教，舊金山公共衛生署STD預防與控制處副主任。
來源：《美全診斷論壇》