Hoechst染色實驗

Hoechst染料 二甲基亞砜染料 二苯亞胺 甲基水楊酸

熒光顯微鏡 水浴鍋 烘箱 培養箱

1.  用水按1：500稀釋1 mg/ml 的Hoechst 染液至終濃度2 μg/ml。將稀釋染液加于切片上或將玻片浸于染液中，置室溫2 min。

2.  室溫下，在水中洗2 min，晾干。

3.  在42℃至55℃烘箱中，烘烤玻片30~60 min，取出置室溫。

4.  用0.5 g/ml 加拿大香柏油為介質，加上蓋玻片，將玻片置室溫干燥2天。

5.  用Hoechst 落射熒光鏡頭觀察細胞核，用紅色濾光片蓋住光源并同時以暗視場觀察銀粒。銀粒將顯示紅色且與顯示藍色熒光的細胞核形成鮮明對比。如欲照像，可對細胞核和銀色的顆粒進行二次曝光。

1.  勿用Permaunt，因在觀察細胞核時會出現自發突光，加拿大香柏油能很好地顯現石蠟切片并在紫外照射下不發熒光，Gelvatol 可用于冰凍切片，但不應用于石蠟切片，因其不能顯現組織成分。