實驗概要
IL-1主要由活化的單核/巨噬細胞產生，具有廣泛的生物學活性。IL-1包括IL-1α和IL-1β，兩者分子量相近，且均能與IL-1R結合，故具有相似的生物學活性，常用的IL-1生物活性檢測法對兩者均適用。常用的IL-1生物活性檢測法包括：小鼠胸腺細胞增殖法、L929細胞增殖法、D10G4.1細胞增殖法等。這些方法均不能區分IL-1α與IL-1β，只能用免疫學檢測法才能加以區分。由于體液中IL-1含量極少，難以直接測定，故通常是通過檢測體外誘生的IL-1來反映體內IL-1活性水平。
實驗原理
LPS是IL-1α與IL-1β的誘生物，能在體外誘導單核/巨噬細胞產生IL-1α與IL-1β。下面重點介紹以小鼠腹腔巨噬細胞活性制備IL-1。
主要試劑
1. 75%酒精.
2. LPS：10% FCS-RPMI-1640培養液配制成10μg/ml。
3. 5% FCS-HBSS(Hanks液)，10% FCS-RPMI-1640培養液。
主要設備
帶9號針頭的無菌注射器(5ml以上)，刻度吸管，毛細吸管，刻度離心管，加樣器(頭)，24孔細胞培養板，溫浴箱，細胞計數板，例顯微鏡，離心機，超凈工作臺，CO2培養箱等，0.22μm濾膜及濾器
實驗材料
BALB/c或C57BL/6小鼠：6-10周齡，雌雄均可。
實驗步驟
1. 將BALB/C或C57BL/6小鼠拉頸處死后，浸泡入75%酒精中3~5min，消毒處理；
2. 用帶9號針頭的無菌注射器向小鼠腹腔內注入5ml冷的5% FCS-HBSS，用消毒拇指輕揉腹部數次后，吸回腹腔液體(內含腹腔細胞及巨噬細胞)，反復抽吸幾次；
3. 置刻度離心管中，以1500r/min離心8min，并用5% FCS-HBSS洗滌細胞2次；
4. 將腹腔細胞用10% FCS-RPMI-1640培養液調細胞濃度為2×106/ml；
5. 將上述細胞懸液加至24孔平底培養板中，1ml/孔，置37℃，5%CO2培養箱中孵育2h；
6. 用5% FCS-HBSS洗板3次，棄去未粘附細胞，貼壁細胞為巨噬細胞單層；
7. 將LPS(10μg/ml)加入巨噬細胞單層，1ml/孔，置37℃，5% CO2培養箱中培養4h；
8. 再加入10% FCS-RPMI-1640培養液，１ml/孔，37℃，5%CO2培養箱中培養至48h；
9. 收集細胞培養上清液，即為含IL-1的待測樣品，用0.22μm濾膜過濾除菌后，分裝后置-20℃或-70℃冰箱中，待測IL-1活性。
注意事項
1. 一般一只小鼠腹腔液可獲腹腔細胞3~5×106，能滿足誘生IL-1所需細胞數，所獲細胞存活率應>95%。
2. 若要測定人IL-1的生物活性，可參見本書第六章，分離出外周血單核巨噬細胞，用LPS刺激即可。