目前對內毒素致病機理的研究已達分子水平,研究表明當L PS 與單核/ 巨噬細胞表面的mCD/ 4結合后, 通過一系列細胞內信號傳導使NF -κB 活化, 活化的NF -κB 進入細胞核與靶基因的啟動子區域的特定序列結合, 迅速誘導mRNA 合成, 釋放多種細胞因子(cytokines) 如TNF - α和IL —1等[2 , 3 ]。在進行的減少內毒素有害作用的研究中, 用L PS 誘導巨噬細胞產生TNF , 建立內毒素感染的細胞模型是該研究工作的基礎。模擬細胞在體內受感染的狀態, 將純化的L PS 加入到大鼠巨噬細胞的培養液中,刺激其產生TNF 。經多次試驗調整L PS 劑量和作用時間, 優化反應條件, 成功誘導出TNF 。TNF 的分泌量與L PS 用量有關,在低濃度下, TNF 分泌量與L PS 正相關,但L PS 濃度過大反而使TNF 分泌量減少。誘導時間不能低于24h 。
L PS 誘導巨噬細胞產生TNF ( x ±s) ( n = 4)
組別 TNF-α(pg/ ml)
1640 培養 2182 ±1. 88
L PS 215μg/ ml 8. 13 ±1.25 *
L PS 510μg/ ml 7. 50 ±4. 51 *
F 6. 825
P 0. 004
* 與1640培養液組比較P < 0. 05